近年来,随着生命科学研究的飞速进展,恶性肿瘤细胞内的信号转导、细胞周期的调控、细胞凋亡的诱导、血管生成以及细胞与胞外基质的相互作用等各种基本过程正在被逐步阐明,以一些与肿瘤细胞分化增殖相关的细胞信号转导通路的关键酶作为药物筛选靶点,发现选择性作用于特定靶点的高效、低毒、特异性强的新型抗癌药物已成为当今抗肿瘤药物研究开发的重要方向。其中丝/苏氨酸激酶Aurora B正日益成为国际上抗肿瘤药物研究的热点。丝/苏氨酸蛋白激酶Aurora B在大多数恶性肿瘤中均高表达,在细胞周期中的作用直接影响了基因组的稳定,它的异常调控可导致肿瘤的发生,Aurora B高表达与肝细胞癌、肺癌等肿瘤的预后也密切相关。因此,Aurora B被视为具有很好市场潜力的抗肿瘤药物开发的一个新靶点,并受到极大的重视。目前已报道的Aurora B激酶抑制剂绝大部分处于临床前研究,少数进入临床研究的尚处于Ⅰ/Ⅱ期阶段,目前尚无有效的特异性Aurora B激酶抑制剂上市。基于Aurora B激酶在肿瘤发生发展过程中的重要作用及目前针对激酶为靶点的抗肿瘤药物研究现状,本论文以丝／苏氨酸蛋白激酶Aurora B为分子靶点,采用Bac-to-BacTM昆虫杆状病毒表达系统表达了具有激酶活性的Aurora B激酶活性蛋白,研究了激酶活性和酶浓度、底物浓度及ATP浓度的关系,确定了酶量为0.5μl/孔、ATP浓度为20μM,底物浓度为200nM试验参数。最后使用AuroraB抑制剂VX680对该模型进行了验证,表明了该模型的可行性,可用于筛选Aurora B激酶的抑制剂。应用建立的模型,我们对182个化合物进行了筛选。筛选中发现了CGM系列5个化合物具有Aurora B激酶抑制活性,其IC50为微摩尔级,其中有两个化合物对MCF7细胞中Aurora B激酶活性具有一定的抑制作用。综上所述,本研究建立了一个基于酶联免疫吸附法原理(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay, ELISA)的稳定灵敏的Aurora B激酶抑制剂筛选模型,并利用该模型进行了靶向蛋白激酶Aurora B的抗肿瘤药物的初步筛选,为靶向Aurora B激酶抗肿瘤药物的研制提供了筛选平台和候选化合物,将极大地推动Aurora B靶向抗肿瘤药物的开发。