【摘 要】
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目的探讨转染CDMP-2(软骨源性形态发生蛋白2)基因后的成肌细胞与PLGA(聚乳酸/乙醇酸共聚物)材料的相容性。方法取新生5d的SD大鼠骨骼肌,采用混合酶一步消化分离获取成肌细胞,将差
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目的探讨转染CDMP-2(软骨源性形态发生蛋白2)基因后的成肌细胞与PLGA(聚乳酸/乙醇酸共聚物)材料的相容性。方法取新生5d的SD大鼠骨骼肌,采用混合酶一步消化分离获取成肌细胞,将差速贴壁法和胰酶消化法相结合进行纯化,观察形态学特点,生长状况,并检测desmin表达。采用脂质体转染方法将CDMP2基因转染P3代成肌细胞,将成肌细胞和转染CDMP-2基因的成肌细胞分别接种于PLGA支架上。分4组:A成肌细胞;B转染CDMP-2基因的成肌细胞;C成肌细胞+PLGA支架;D转染CDMP-2基因的成肌细胞+PLGA支架。采用MTT法检测各组成肌细胞的生物活性,绘制生长曲线,在扫描电镜下观察细胞形态。结果细胞接种于PLGA支架后早期,倒置相差显微镜视野内见不到细胞在支架表面生长、附着,只能看到纵横交错的纤维网状结构。72小时后可见细胞增殖,细胞数量显著增多。MTT示各组成肌细胞在492nm波长时分别为0.046414,0.057665,0.038945,0.049911;在629nm波长时分别为0.132158,0.178811,0.108284,0.173810,ABCD各组在统计学上都无统计学意义(P>0.05)。结论成肌细胞能够在PLGA支架上生长良好,说明PLGA材料对成肌细胞无细胞毒性,具有优异的生物相容性,可用于组织修复,为进一步研究软骨损伤的修复提供了新的思路和方法。
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