基于SELDI-TOF-MS技术的壶腹周围癌血清蛋白质谱的初步研究

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目的:壶腹周围癌包括壶腹癌,胆总管下端癌和十二指肠癌,各种壶腹周围癌之间生物学特性不同,具有不同的预后。同时临床上壶腹周围癌又常与胰头癌混淆,而两者生物学特性和预后差异明显。我们运用SELDI-TOF-MS技术对各壶腹周围癌及胰头癌血清蛋白质谱图进行比较,探索各肿瘤间血清蛋白质的差异,且通过差异蛋白组学筛选壶腹癌特异的肿瘤标志物,并建立决策树诊断模型,期望找到早期诊断壶腹癌的方法。方法:运用表面增强激光解吸离子化飞行时间质谱(SELDI—TOF—MS)技术对经病理诊断的27例壶腹癌,12例胆总管下端癌,34例胰头癌和30例正常对照组血清进行检测。检测结果采用BiomakerWizard3.1版分析软件筛选有统计学意义的差异蛋白,对壶腹癌,胰头癌,胆总管下端癌进行两两比较,探索相互之间是否存在差异。运用SPSS17.0软件建立壶腹癌的决策树诊断模型,并运用ROC曲线比较诊断价值,最后通过蛋白质数据库检索差异蛋白质,初步鉴定差异蛋白。结果:1.壶腹癌,胰头癌,胆总管下端癌相互之间血清蛋白质的表达存在差异。2.壶腹癌组和正常对照组有32个显著差异的蛋白质峰(P值<0.05),其中壶腹癌组有10个蛋白质谱峰的表达相对增高,有22血清蛋白质谱峰降低。壶腹癌组和胰头癌组之间有14个差异表达蛋白,其中壶腹癌组与胰头癌组相比有13个蛋白质谱峰降低,有一个增高。壶腹癌和胆总管下端癌血清蛋白质谱结果相比较,有6个增高,2个降低。胆总管下端癌和胰头癌血清蛋白质谱结果相比较,有18个差异表达蛋白,全部都降低。3.运用ROC曲线作图分析CA19-9对壶腹癌和正常对照组鉴别诊断的价值,在CA19-9以47.9u/ml为分界点时具有最大诊断价值,特异性和敏感性分别为66.7%和70.4%。4.决策树诊断模型,CA19-9,M/Z8612,M/Z6583对壶腹癌的诊断效果相互比较,ROC曲线下面积分别为0.861,0.685,0.787,0.708。决策树诊断模型具有最好的诊断价值,M/Z6583,M/Z8612两种蛋白也比传统的肿瘤标志物CA19-9具有更好的诊断效果。5.利用TagIdent搜索工具在Swiss-Prot蛋白质数据库中检索M/Z6583,M/Z8612,分别获得2种和4种候选蛋白。结论:1.研究结果表明壶腹癌组、胆管下端癌组、胰头癌组之间血清蛋白质的表达具有差异性。筛选其中差异表达的蛋白有利于进一步探索各肿瘤之间预后差异的分子基础。2.壶腹癌和正常对照组血清蛋白指纹图谱之间存在差异,M/Z6583,M/Z8612两种蛋白比传统的肿瘤标志物CA19-9具有更好的诊断效果,对两种蛋白的进一步研究将有利于壶腹癌的鉴别诊断及深入了解壶腹癌的具体发生发展过程。3.决策树诊断模型具有很高的诊断价值,和CA19-9, M/Z6583,M/Z8612相比,ROC曲线下面积分别为0.861,0.685,0.787,0.708。决策树诊断模型具有很好的临床价值,有可能成为筛选壶腹癌的一种新方法。
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