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目的:基于高通量测序技术探讨微小RNA(miRNA)在窦性心律(Sinus Rhythm,SR)及心房颤动(Atrial fibrillation,AF)患者血浆外泌体中的表达差异,寻找可能和房颤发生发展密切相关的潜在标志物,初步探索其生物学作用。方法:1.本研究筛选2018-06至2019-06至某院就诊的患者为研究对象,其中房颤组(AF Group)患者26人,窦性心律组(SR Group)23人,统计临床资料,根据房颤发作持续时间分为阵发性心房颤动组(Paroxysmal AF Group,PaAF,n=13)及持续性心房颤动组(Persistent AF Group,PeAF,n=13)。2.提取血浆外泌体,透射电子显微镜观察外泌体形态,粒径检测,蛋白印迹法(Western Blot,WB)检测表面标志蛋白。3.每组随机选取3例,采用高通量测序技术获取外泌体miRNA差异表达谱,查找文献,采用生信学分析筛选出和心血管疾病相关的目标miRNA。4.对SR组(n=20)及AF组(n=20)患者,应用实时荧光定量技术(qPCR)验证目标miRNA,使用受试者工作特征曲线(Receiver operating characteristic curve,ROC曲线)评估miRNA作为标志物的效能。结果:1.较SR组相比,AF组甘油三酯水平升高,左房前后径扩大、左心室射血功能下降,年龄性别等一般资料及肝肾功能等方面无明显差异。2.成功在房颤患者血浆中分离出外泌体,电镜下可观测到典型的外泌体结构的囊泡,三个表面标志蛋白:CD9、CD63、TSG101,表达均呈阳性。3.高通量测序结果显示较SR组相比,AF组上调的miRNA有33个,下调的有117个,其中上调的miRNA中有4个和心血管疾病密切相关。4.靶基因富集分析提示我们所关注的显著上调的20个miRNA的靶基因主要富集在信息传导及能量代谢等方面的通路,可能通过调控下游MET信号通路和VEGF信号通路,发挥生物学功能。5.qPCR结果显示miR-1306-5p、miR-4433b-3p的表达水平和测序结果一致,AF显著高于SR组。ROC曲线分析提示miR-4433b-3p:AUC=0.885,敏感性80%,特异性90%,miR-1306-5p:AUC=0.692,敏感性65%,特异性70%,miR-4433b-3p可能作为早期诊断或筛查AF的标志物。结论:1.较SR组相比,AF组甘油三酯水平升高,左心房扩大,心功能恶化。2.SR组和AF组血浆外泌体之间存在差异miRNA,上调的miRNA有33个,下调的有117个。3.生信学分析提示上调的miRNA主要富集在信息传导及能量代谢等方面的通路。相关miRNA可能通过调控下游MET信号通路和VEGF信号通路,诱导新生血管增殖,发挥生物学功能。4.血浆外泌体miR-4433b-3p可能作为早期诊断房颤的生物学指标。