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菊花（Chrysanthemum×morifolium Ramat.）是我国传统名花，也是世界重要切花，每年都有大量包括切花和盆栽品种在内的丰硕的育种成果。花色是菊花的一个重要观赏性状，培育蓝色菊花是众多育种家的梦想。蓝色花的花色素苷主要是飞燕草色素及其衍生物，而类黄酮-3’，5’-羟化酶（F3’5’H）是合成蓝色花色素的关键酶，PCFH是F3’5’H的同源基因，克隆自瓜叶菊，利用基因工程技术将PCFH基因导入菊花，通过改变花色素苷的合成途径从而产生蓝色或紫色的花，对培育蓝色菊花品种具有重要意义。本研究以4个白色菊花品种和6个粉色菊花品种为试材，筛选出‘Reagan Elite White’、‘Vamp Time Pink’、‘Reagan Elite Improved’和‘荷兰白’4个菊花品种的高频再生体系，建立并优化了遗传转化体系，将PCFH基因转入菊花品种‘Reagan Elite White’中。试验结果如下：1．利用菊花的茎段和花瓣作为外植体获得无菌苗。通过试验发现：茎段适宜灭菌条件为有效氯浓度0.1～0.15％灭菌10～15min，花瓣适宜灭菌条件为有效氯浓度0.3％灭菌10～15min。除‘桃花尖’用MS+6-BA 0.2mg／L+NAA 0.02 mg／L培养基增殖外，其余品种均用MS培养基继代增殖。2．以MS为基本培养基，添加不同浓度的6-BA、NAA作为再生培养基，研究了不同菊花品种以不同材料作为外植体的再生情况。结果表明，不同基因型的菊花再生率差别很大。其中，‘Reagan Elite White’以叶盘、薄层为外植体可进行高效再生，再生率分别为87.4％、87.2％。‘Vamp Time Pink’、‘Reagan Elite Improved’和‘荷兰白’分别以茎段、薄层和叶盘外植体进行再生，再生率分别为82.2％、76.2％和66.6％。以1／2MS+NAA0.1 mg／L作为生根培养基，生根苗栽入蛭石中培养，成活率为100％。3．对菊花品种‘Reagan Elite White’进行卡那霉素和羧卞青霉素的敏感性试验，结果表明：‘Reagan Elite White’对卡那霉素比较敏感，培养基中添加10mg／L卡那霉素，叶盘不能分化，培养基中添加10mg／L卡那霉素，无菌苗难以生根。因此，10mg／L卡那霉素可以作为筛选培养基中的抗生素配方；羧苄青霉素可以作为合适的转化抑菌抗生素，培养基中适宜的羧苄青霉素浓度为400～300mg／L。4．菊花品种‘Reagan Elite White’的遗传转化体系试验表明：以预培养2d的叶盘为材料进行转化，用OD600为0.5的菌液侵染，侵染5～10min左右。在MS培养基中共培养2d，在分化培养基中延迟培养3d，按5mg／L→10mg／L卡那霉素逐渐递增的方式连续筛选直至有不定芽生成。羧苄青霉素的浓度开始时为400mg／L，后期为300mg／L。抗性芽在添加10mg／L卡那霉素的生根培养基中进行生根培养。对部分抗性植株进行PCR扩增检测表明：PCFH基因已成功转入菊花中。以上研究成果为今后进一步采用分子育种培育蓝色菊花品种奠定了坚实的基础，对菊花再生体系和转化体系的研究有一定借鉴作用。