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目的:探索构建一种新型的可局部脉冲释放甲状旁腺激素（Parathyroid hormone,PTH）的释药体系及其局部应用促进颌骨骨折愈合的可行性。方法:1、PTH局部脉冲式缓释体系的构建及相关性能检测（1）羧甲基壳聚糖（Carboxymethyl Chitosan,CMCS）、聚乙烯醇（Polyvinyl alcohol,PVA）按体积比分别为100%CMCS（CMCS）、70%CMCS/30%PVA（7C3P）、50%CMCS/50%PVA（5C5P）、30%CMCS/70%PVA（3C7P）共混,采用流延成膜法构建单层膜片,观察单层膜的形貌及表征分析,并进行亲水性、体外降解率及溶胀度检测。（2）构建缓释体系:采用CMCS/PVA膜作为控释层,海藻酸钠膜为PTH载药层,构建PTH局部释药体系。扫描电镜（scanning electron microscope,SEM）观察其剖面微观形态,并检测体系体外降解率、p H值。将缓释体系植入大鼠背部皮下,在25天内,行大体观察及HE染色检测缓释体系的体内降解率及生物相容性。（3）根据上述检测结果,选择3C7P比例共混膜构建药物缓释体系并检测其体外体内释药节律。以胎牛血清（Bovine serum albumin,BSA）作为模拟药物,采用BCA试剂盒评估缓释体系BSA体外释药节律。构建PTH缓释体系,采用PTH ELISA试剂盒检测缓释体系释放PTH的释药节律。（4）将PTH缓释体系植入新西兰白兔下颌骨面,每日定点采血,采用全自动发光免疫分析仪检测血清PTH浓度,并与正常兔血清PTH浓度比较。2、PTH脉冲式缓释体系对MC3T3细胞的毒性及其促成骨分化能力研究（1）通过CCK8检测缓释体系浸提液对细胞的影响,评估缓释体系的细胞毒性。（2）将MC3T3细胞与缓释体系共培养,采用DAPI染色和鬼笔环肽染色检测缓释体系的生物相容性,及细胞黏附状况。（3）通过碱性磷酸酶染色及定量,茜素红染色及半定量,RT-q PCR检测成骨相关基因Runx2、Opn、Collagen 1（Col 1）,评估缓释体系浸提液对MC3T3细胞成骨分化的影响。3、PTH脉冲式缓释体系对兔颌骨骨折愈合影响的研究（1）实验分组。将96只新西兰白兔随机分成四组:空白对照组（组1）:微型钛板钛钉固定;阴性对照组（组2）:空白局部缓释体系（不含PTH）+微型钛板钛钉固定;阳性对照组（组3）:微型钛板钛钉固定骨折+隔日皮下注射20μg PTH;实验组（组4）:PTH局部缓释体系+微型钛板钛钉固定。建立兔下颌骨骨折复位固定模型,分别于术后1、2、3、4周记录骨折愈合状况,并行标本处理做后续检测。（2）通过对骨折区大体观察、影像学检测、HE染色后对骨折区愈合状况半定量评分及病理学评分,评价各组骨折愈合状况。通过免疫组织化学和RTq PCR方法检测新生骨组织Runx2、Collagen 1（Col 1）、BMP-2、VEGF成骨因子的表达情况。结果1、PTH局部脉冲式缓释体系的构建及相关性能检测（1）CMCS/PVA共混膜的表征检测可见,共混膜中含有CMCS和PVA的特征键及元素。扫描电镜见,CMCS膜微观形态为较为平整的光滑膜,而CMCS/PVA共混膜微观形态为颗粒状,PVA含量越高其颗粒粒径越大,3C7P膜的粒径为10±1.21μm。（2）CMCS、7C3P、5C5P、3C7P共混膜溶胀及体外降解检测中,CMCS含量越高,溶胀越快,降解越快,其中3C7P共混膜24小时内降解约20%,3小时内溶胀度约为3。同时接触角结果显示,CMCS/PVA共混膜接触角小于单纯的CMCS膜或PVA膜,其中3C7P膜的接触角最小,为（33.19±1.65）°,亲水性最好。（3）检测构建的缓释体系浸提液的p H值,偏碱性。其中3C7P共混膜构建的缓释体系10天内p H值在7.4～7.9之间,最接近于生理性骨组织液p H值。（4）缓释体系体外体内降解速率趋势与单层膜一致。CMCS膜构建的体系降解最快,3C7P共混膜构建的体系降解最慢。同时体内降解过程中见多核巨细胞吞噬材料。（5）缓释体系体内生物相容性结果显示,未见植入区脓肿、伤口裂开、溢脓等排异反应。根据上述实验结果,选择3C7P比例的共混膜构建缓释体系,进行后续实验。（6）模型药物BSA缓释体系及PTH缓释体系的体外释药结果,均显示为脉冲性释放节律。同时对PTH缓释体系检测结果示,35天释放时间释放量约为整个体系的80%。（7）PTH缓释体系植入体内后,血清PTH值检测结果呈现脉冲性波动,同时平均血清PTH含量高于正常兔血清PTH。本部分实验结果示,构建的缓释体系体外体内研究中均呈现脉冲性释药节律,是一种可自我调节脉冲释放系统。2、PTH脉冲式缓释体系对MC3T3细胞的毒性及其促成骨分化能力研究（1）CCK-8检测结果提示,缓释体系浸提液对细胞无毒性。（2）脉冲式缓释体系与细胞共培养,肌丝蛋白充分伸展,细胞黏附于材料表面。（3）通过ALP,茜素红染色,RT-q PCR检测Runx2、OPN、Col 1评估成骨诱导结果,相比成骨诱导液（阴性对照组）,PTH缓释体系浸提液成骨诱导的速度更快,效果更好,并与加入PTH的成骨诱导液（阳性对照组）效果相当。本部分结果显示,缓释体系具有较好的细胞黏附效果,其浸提液对细胞无毒性,同时PTH局部脉冲式缓释体系浸提液可促进MC3T3细胞成骨,呈现与单纯PTH作用同样的效果。3、PTH脉冲式缓释体系对兔颌骨骨折愈合影响的研究（1）通过对骨折区大体观察、影像学检测、HE染色后对骨折区愈合状况半定量评分及病理学评分,评价各组骨折愈合状况。结果显示,PTH局部脉冲式缓释体系组骨折愈合速度加快,与全身注射PTH骨折愈合效果相当。（2）通过免疫组织化学和RT-q PCR方法检测新生骨组织Runx2、CollagenΙ（ColΙ）、BMP-2、VEGF成骨因子的表达情况,PTH局部脉冲式缓释体系组与全身注射PTH组各成骨因子表达趋势一致,有促进成骨的效果。结论:（1）3C7P共混膜构建的PTH脉冲性局部释药系统具有较好的生物相容性,并可达到体内体外脉冲性释放PTH的效果。（2）该PTH脉冲性局部释药系统可与MC3T3共培养,有较好的细胞黏附效果,并促进细胞成骨分化。（3）PTH局部脉冲式缓释体系可促进兔颌骨骨折的愈合,达到与全身注射PTH同样的效果。综上,本实验构建了一种新型PTH脉冲缓释剂型,改变常规PTH皮下注射给予方式;局部应用后可减少PTH剂量,提高局部组织对PTH的生物利用度;同时对加速骨折愈合,促进患者尽早康复具有重要的应用基础研究价值和社会效益,可为在口腔颌面创伤救治领域转化应用提供理论和实验依据。