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目的:探讨表皮生长因子受体(EGFR)酪氨酸激酶抑制剂吉非替尼(Gefitinib)对雄激素非依赖性前列腺癌细胞系DU145的生长抑制作用及其对EGFR和血管内皮生长因子受体(VEGFR)表达水平的影响。方法:不同浓度的吉非替尼(0～20umol/L)分别与DU145细胞(2×104/ml)体外培养24、48、72、96、120h后采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法测定细胞生长抑制率;不同浓度吉非替尼(0～20umol/L)分别与DU145细胞(1×105/ml)体外培养48小时后普通光学显微镜及激光共聚焦显微镜下观察细胞形态学及超微结构改变;流式细胞仪测定细胞周期的分布;DNA凝胶电泳法检测药物对细胞凋亡的诱导作用;Western blot法分析细胞EGFR和VEGFR两种蛋白表达水平的变化。结果:DU145细胞在DMEM中培养,每2～3天传代一次。MTT比色法显示吉非替尼可以抑制DU145细胞生长,且具有明显的剂量-效应和时间-效应依赖关系,测得最佳药物浓度为10umol/L,最佳作用时间为48小时。流式细胞仪检测显示:吉非替尼可阻滞DU145细胞周期进程于G1期。细胞形态学上可观察到细胞皱缩、核质浓缩、核碎裂以及凋亡小体等典型的凋亡形态学改变;DNA凝胶电泳出现典型的阶梯状排列的DNA梯带;Western blot条带灰度值结果显示DU145细胞EGFR、VEGFR蛋白阳性表达(0.835±0.102、0.419±0.134),经各浓度组吉非替尼处理后,DU145细胞上EGFR、VEGFR蛋白表达分别为0.749±0.031和0.383±0.124(2.5 umol/L)、0.470±0.087和0.358±0.133(5 umol/L)、0.388±0.147和0.219±0.087(10 umol/L)、0.117±0.074和0.089±0.029(20umol/L),与对照组相比两蛋白表达均有不同程度的下降,下降百分比分别为10.92%和8.59%(2.5 umol/L)、43.71%和14.56%(5 umol/L)、53.53%和47.64%(10 umol/L)、85.98%和78.76%(20umol/L)。统计学分析显示吉非替尼对EGFR、VEGFR两蛋白表达均有明显抑制作用(p<0.05)。结论:吉非替尼对人非激素依赖性前列腺癌细胞系DU145具有明显的生长抑制作用;吉非替尼对DU145细胞的生长抑制作用与其能诱导该细胞发生凋亡有关;吉非替尼诱导DU145细胞凋亡的分子机理与下调EGFR、VEGFR蛋白的表达有关。