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目的:探究C-藻蓝蛋白(C-phycocyanin,C-PC)对转化生长因子(Transforming growth factor beta 1,TGF-β1)诱导后宫颈癌细胞上皮-间充质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的作用。方法:采用10ng/m L的TGF-β1诱导宫颈癌Caski细胞,显微镜观察未诱导组和TGF-β1诱导组的细胞形态变化,Western blot检测两组间质标志蛋白N-cadherin和上皮标志蛋白E-cadherin的表达水平差异。随后将实验分为三组:对照组,TGF-β1(10ng/m L)处理组,TGF-β1(10ng/mL)联合C-PC(300μg/mL)处理组。分别处理24h,48h后利用划痕实验及Transwell实验检测C-PC对TGF-β1诱导后Caski细胞迁移和侵袭能力的影响。Western blot及免疫荧光实验技术检测C-PC对TGF-β1诱导后Caski细胞上皮表型标志蛋白E-cadherin、间质表型标志蛋白N-cadherin的表达水平影响。随后,Western blot检测C-PC对TGF-β1诱导后宫颈癌Caski细胞中TGF-β/smads信号通路的影响。并运用实时定量PCR技术检测间质表型相关的转录因子(Snail、Zeb1、Twist)mRNA的表达水平。此外,流式细胞术检测C-PC联合TGF-β1处理宫颈癌Caski细胞24h和48h后对细胞周期的作用,并利用Western blot检测细胞周期相关蛋白(CyclinD1,p21,p27)的蛋白表达水平变化。结果:1、TGF-β1刺激宫颈癌Caski细胞后在显微镜下观察到细胞形态发生很明显的改变,原本排列紧密的上皮表型细胞形态逐步向排列松散的间质表型细胞形态过渡,失去原有的上皮表型的特征。2、划痕实验和Transwell实验结果显示10ng/mL TGF-β1处理的细胞迁移和侵袭能力较对照组相比明显增强,TGF-β1联合C-PC处理组细胞48h逆转了TGF-β1处理后对宫颈癌Caski细胞的迁移和侵袭能力的增强作用,提示C-PC可能使发生EMT的宫颈癌Caski细胞的侵袭和迁移能力受到抑制。3、Western blot显示单独TGF-β1组下调了上皮表型标志蛋白E-cadherin的表达水平,对N-cadherin的蛋白表达量无明显的影响。TGF-β1联合C-PC处理组逆转了TGF-β1组的现象,上调了上皮表型标志蛋白E-cadherin的表达水平,下调了间质表型标志蛋白N-cadherin的蛋白表达水平。4、实时定量PCR显示,与单独TGF-β1处理组相比,TGF-β1联合C-PC处理组同时降低了EMT相关转录因子Twist、Snail和Zeb1的m RNA和蛋白表达水平,证实C-PC可以抑制上皮-间充质转化的发生。5、流式细胞术检测发现TGF-β1与对照组相比能够使G0/G1期细胞周期细胞数量的减少,增加G2/M期细胞数量,加快细胞周期进展,TGF-β1联合C-PC处理组与TGF-β1处理组相比,可使细胞周期发生G0/G1期阻滞,并通过Western blot提示C-PC可能通过下调Cyclin D1,上调p21蛋白的表达阻碍TGF-β1对细胞周期进程的促进作用。6、在此基础上,Western blot发现TGF-β1处理组与对照组相比TGF-βⅡ型受体的表达水平明显增高,对psmad2/3的蛋白水平无明显影响,但提高了总蛋白smad2/3的表达水平。TGF-β1联合C-PC处理组细胞中TGF-βⅡ型受体和psmad2/3的表达水平明显受到抑制。结论:C-PC对TGF-β1诱导的宫颈癌Caski细胞侵袭转移有抑制作用,并抑制上皮间充质转化过程,这种作用可能是通过抑制TGF-β/smads信号通路、阻止细胞周期进程来实现的。