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干旱、高盐及低温等环境条件，都会构成对植物的渗透胁迫，使植物缺水受伤害，甚至导致植物死亡，是造成作物减产的主要原因。生产上主要采用抗逆性强的品种。黑穗醋栗(Ribesnigrum L. )属于多年生木本果树，世代周期长，杂合性高，许多重要经济性状属于多基因控制的数量性状，遗传机理不明，利用常规方法进行品种选育困难重重。利用基因工程手段将外源基因导入作物中，培育出新的品种已成为现代农业和农作物育种的发展方向。但是黑穗醋栗属于木本果树，离体培养技术还不完善，再生有困难，常常无法获得再生植株，并且缺乏高效的遗传转化方法。 针对以上问题，本研究以黑穗醋栗为试材进行组织培养和遗传转化的初步研究，本研究构建了 osCDPK7 基因和osMAPK4 基因的植物表达载体；建立了黑穗醋栗茎尖再生体系；利用基因枪法和农杆菌介导法将 osCDPK7 基因和osMAPK4 基因转化黑穗醋栗，以期获得转基因植株，来增强作物抗逆性。 本研究主要研究结果如下：1. 载体构建 构建了 2 个植物表达载体 PBC7E12 和 PBME12。载体 PBC7E12 上带有组成型启动子 E12 调控的 osCDPK7 基因，植物筛选标记为 nptⅡ基因。载体 PBME12 上带有组成型启动子 E12 调控的 osMAPK4 基因，植物筛选标记为 nptⅡ基因。2. 黑穗醋栗再生体系的建立（1） 黑穗醋栗愈伤组织的诱导 利用黑穗醋栗叶片、叶柄和茎段诱导愈伤组织，研究了 不同 PGR 配比对黑穗醋栗愈伤组织诱导的影响，为下 一步通过愈伤组织诱导不定芽奠定了基础。（2） 黑穗醋栗茎尖培养培养基的确定 V<WP=9>摘 要 确 定 了 黑 穗 醋 栗 茎 尖 最 佳 分 化 和 继 代 培 养 基 为 MS+1mg/L BA，30g/L 蔗糖，0.8%琼脂，pH5.8。 最佳从生芽生根培养基为 1/2MS，30g/L 蔗糖，0.8%琼 脂，pH5.8。3. 基因枪法对黑穗醋栗茎尖的遗传转化 确定茎尖分化阶段卡那霉素的筛选压力为 25mg/L。丛生芽生根阶段卡那霉素筛选压力为 20mg/L。利用基因枪法转化黑穗醋栗茎尖获得抗性芽，抗性芽率为 8.4％。4. 农杆菌介导法对黑穗醋栗茎尖的遗传转化 利用农杆菌介导法转化黑穗醋栗茎尖获得抗性芽，抗性芽率为 10.5％。5. 转基因植株的分子检测 基因枪法转化获得的抗性植株，经 PCR 检测，获得 osCDPK7 基因阳性的植株 1 株，获得 osMAPK4，基因阳性的植株 1 株。PCR 阳性率为 9.1%。 目前，利用农杆菌介导法转化黑穗醋栗茎尖已获得大量抗性苗，正在继续对转化植株进行筛选培养。下一步将对利用农杆菌介导法转化黑穗醋栗茎尖获得的抗性芽进行检测。