【摘 要】
：
胎牛血清（Fetal bovine serum,FBS）作为常规细胞培养添加物在细胞的获取,体外培养等应用中具有重要作用。但FBS售价相对较高且不同品牌FBS的细胞培养效果不同,与此同时血小板裂解液（Platelet lysate,PL）也可作为细胞培养添加物,若以猪作为血小板裂解液的来源动物,制作成本相对较低。为探究猪血小板裂解液（Porcine platelet lysate,PPL）是否能代
【基金项目】
：
国家自然科学基金项目:EpCAM 裂解产物调控猪干细胞多能性的分子机制（31802059）； 国家自然科学基金项目:血小板裂解物激活猪iPS细胞中OCT4远端增强子的机制研究（31902226）； 地方猪遗传材料采集制作（19339025）； 新农村发展研究院:江淮水牛遗传材料制作（2135304
论文部分内容阅读
胎牛血清（Fetal bovine serum,FBS）作为常规细胞培养添加物在细胞的获取,体外培养等应用中具有重要作用。但FBS售价相对较高且不同品牌FBS的细胞培养效果不同,与此同时血小板裂解液（Platelet lysate,PL）也可作为细胞培养添加物,若以猪作为血小板裂解液的来源动物,制作成本相对较低。为探究猪血小板裂解液（Porcine platelet lysate,PPL）是否能代替FBS作为细胞培养添加物,本研究使用PPL和FBS培养江淮水牛骨髓间充质干细胞,对比水牛细胞在两种培养条件下的生长性能和诱导分化性能。目的:用胎牛血清和猪血小板裂解液培养江淮水牛骨髓间充质干细胞（Bone marrow mesenchymal cells,BMSCs）,并对比水牛骨髓间充质干细胞在PPL和FBS中的生长情况,研究细胞在异种细胞培养添加物中的细胞特性,比较BMSCs在两种培养体系下的分化潜能,为猪血小板裂解液替代血清培养细胞提供理论依据。方法:采集新鲜抗凝猪血,制备猪血小板裂解液。用含10%PPL和FBS的培养基分别对江淮水牛骨髓间充质干细胞进行培养,在显微镜下观察细胞状态。用cck-8细胞检测试剂盒测定第3代细胞在两种培养条件下7天的增殖效率,并绘制细胞生长曲线图。通过免疫荧光染色鉴定水牛BMSCs在两种培养条件下表面特异性抗原的表达。最后对PPL和FBS培养条件下的水牛BMSCs进行成脂肪、成骨、成软骨诱导分化性能测定。结果:（1）成功制备猪血小板裂解液;（2）用10%PPL和FBS培养的细胞符合间充质干细胞的形态学特征,在PPL培养的细胞与FBS中的细胞形态上无明显差异;（3）第3代细胞生长曲线结果表明,使用FBS培养细胞增殖速率略高于PPL;（4）细胞免疫荧光结果表明,水牛BMSCs在两种培养条件下,染色结果较为一致;（5）细胞体外诱导试验表明水牛BMSCs在PPL和FBS培养条件下均具有多潜能性,且细胞在不同培养条件下分化性能略有差异。结论:（1）成功制备PPL,并且细胞在PPL中培养保持生物学特性;（2）与FBS相比,PPL作为细胞培养添加物后并未明显改变细胞生物学特性,两种培养体系下的细胞均具有多潜能性,为PL代替FBS培养细胞提供了基础数据参考;（3）在诱导分化过程中,PPL和FBS表现出各自的培养优势。本试验对比江淮水牛BMSCs在两种培养条件下的细胞生物学特性,为今后用PPL代替FBS培养细胞提供基础数据支撑。
其他文献
低LUMO/HOMO能级的有机小分子的种类和数量都很少，其设计与合成具有重要的科学价值和应用价值。传统的设计超低LUMO/HOMO能级有机小分子的策略是在分子中引入多个氰基。本工作设计并合成了含有四个硼氮配位键和两个酰亚胺基团的稠环芳烃分子，不含有氰基。该分子的LUMO能级低至－4.77 eV，HOMO能级低至－6.39 eV，是已报道的硼氮配位键稠环小分子的最低值，和已报道的氰基类有机小分子具有
本试验旨在研究笼养和地面平养对皖南三黄鸡生长性能、屠宰性能、肉品质、福利指标、血液生化指标及肠道微生物的影响,为饲养方式提供参考。5周龄时随机挑选体重相近公母鸡各300只,分为笼养公鸡、笼养母鸡、地面平养公鸡、地面平养母鸡4个试验组,每组150只鸡。分别测定5、7、9、11、13周龄体重,13周龄时全群个体评价脚垫、跗关节、羽毛损伤及步态等福利指标,开展屠宰性能、肉品质和相关血液生化指标测定,同时
精液冷冻保存在畜禽繁殖和保种上具有重要价值。精子的抗冻能力因品种、个体不同而各异,发掘精子耐冻性生物标志物或基因,有助于选育精子耐冻品种。本研究选择精子耐冻性高的霍寿黑猪精清和耐冻性低的精清为材料,通过代谢组学技术检测和分析两组间精清代谢物的成分差异,以期为筛选和预测霍寿黑猪精清中与耐冻性相关的生物标志物提供依据。具体研究内容和结果如下:采集15头霍寿黑猪种公猪的精液进行低温冷冻并解冻检测,依据解
由于湖羊易规模化养殖且繁殖性能好,近年来在安徽省得到快速发展。为进一步提升养殖湖羊经济效益,通过研究东湖杂交羊和湖羊的初生到十月的体重体尺、八月龄羊屠宰性能、繁殖母羊的繁殖性能、泌乳量以及乳质,进行东湖杂交羊杂交效果分析。并对东湖杂交羊和湖羊进行产羔数与GDF9基因相关性分析。本研究结果如下:（1）东湖杂交羊与纯繁湖羊生长发育性能比较:东湖杂交羊在初生到十月龄时公、母羊的体重、日增重均高于湖羊。东
本研究利用自主培育的C3和C4系杂交后代再横交的方法创制了三种不同羽色的蛋鸡育种新素材,并对其生产性能进行测定与分析。在1-18周每周选择100只测量体重并进行生长曲线拟合,在18和32周抽测100只鸡的体尺;19周龄时通过肉眼观察记录全群凤头平头性状、胫色和趾数并进行分析;计算22-57周的平均周产蛋率,对22-43周平均产蛋率和产蛋数进行曲线拟合;测定40和53周龄蛋品质并进行分析,试验结果如
随着畜牧业集约化、规模化的发展,产生的畜禽粪污已经成为环境污染的重要源头之一,不加以处理会严重污染环境,同时危害人类健康。畜禽粪便的利用方式有肥料化、能源化和饲料化等多种形式,其中以肥料化最为普遍。在肥料化利用过程中,条垛式好氧堆肥具有操作简单,成本低廉等优点,成为普遍采用的粪污处理方法。但传统的条垛式好氧堆肥存在周期长、有害物质处理不彻底等缺点,已不能满足目前的需求,需要采用生物技术提升堆肥效率
克氏原螯虾（Procambarus clarkii）,俗称小龙虾,近年来国内小龙虾产业稳定发展,其已成为我国十分重要的水产经济动物之一。克氏原螯虾等甲壳类水产动物在生产、运输和销售过程中必然经历空气暴露胁迫,为明确空气暴露对克氏原螯虾生理功能造成的影响,将克氏原螯虾连续空气暴露处理0、2、6、12、48和96 h,分别取样并检测其抗氧化、免疫以及氨代谢功能相关生理指标,结果显示如下:克氏原螯虾在空
地方家禽繁殖性能普遍较低。本研究以皖南三黄鸡本品种内选育的S3品系为对象,60周龄采用B超仪活体测量腹脂厚指标确定高低腹脂组,分析种蛋孵化性能、产蛋量、屠宰性能、各阶段血脂指标及脂肪代谢相关基因表达量等数据,比较高、低腹脂对地方土鸡繁殖性能的影响,结果如下:高腹脂组腹脂厚是低腹脂组腹脂厚的3.7倍,高腹脂组皮肤厚显著高于低腹脂组（P＜0.05）。低腹脂组种蛋死胚率为2.64%,显著低于高腹脂组（6
能源短缺与环境污染一直是备受关注的话题,随着石油的不断开采,部分油田原油产量递减,采出液含水率上升,导致在集输过程中出现了高耗能、低效率的问题,能源浪费现象严重。因此,有必要将基于能量分析和（火用）分析为基础的能级分析理论应用于原油集输系统,探究系统供需能匹配的合理性,从而减少能源浪费,改善用能情况。结合油田原油加热工艺,立足于新能源技术可以实现原始加热能耗倍减的特点,本文提出了三种原油集输系统供
皖岳黑猪是安徽农业大学和安徽省岳西县当地黑猪保种企业联合攻关培育的优质瘦肉型黑猪。关于皖岳黑猪的研究与报道较少,为了适应皖岳黑猪产业化开发的需要,确定其适宜的屠宰体重从而提高其养殖经济效益,本试验选择了平均体重达到95 kg、105 kg、115 kg的皖岳黑猪,每组10头进行屠宰,分别测定其屠宰性能、肉质性能、肌肉抗氧化性、血液生化指标以及肌肉中营养物质含量（氨基酸、脂肪酸、肌苷酸、胶原蛋白等）