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开花是植物发育的重要时期,受表观修饰的调控。SDG8是组蛋白赖氨酸甲基转移酶,通过调节FLC甲基化水平进而调控植物开花。在研究白菜型油菜、甘蓝型油菜和甘蓝的SDG8基因功能时,我们发现SDG8存在一个未知的VHE结构域。本研究用分子生物学和基因工程等手段,对VHE结构域生物学功能进行初步研究,结果如下:1.分别扩增出白菜BraVHE与甘蓝BolVHE,通过In-Fusion法替换拟南芥SDG8中的VHE,构建了如下载体:pAtSDG8-VHE、pBraVHE、pBolVHE、pAtVHE和pAtSDG8P。2.构建好的载体分别转化sdg8-2,得到:1)缺失VHE片段的转基因植株AtSDG8-VHE,2)用BraVHE替换AtSDG8 VHE的转基因植株BraVHE;3)用BolVHE替换AtSDG8 VHE的转基因植株BolVHE;4)AtSDG8基因AtVHE替换本身VHE的转基因植株AtVHE;5)只保留AtSDG8基因VHE之后的4350bp转基因植株AtSDG8P。3.对上述材料开花表型进行统计分析,结果显示:AtVHE、BolVHE和BraVHE的开花时间与Col-0类似;AtSDG8-VHE和AtSDG8P与sdg8-2类似;说明BraVHE和BolVHE与AtVHE功能相似且与植物开花相关,但二者对开花时间的调控有不同。4.对开花关键基因FT、SOC1和FLC进行表达分析,发现:在BolVHE和BraVHE植株中FT和SOC1表达水平下调;FLC表达水平上调且与Col-0类似,进一步说明BraVHE和BolVHE与AtVHE的调控开花的途径类似。5.成功构建了甘蓝型油菜CRISPR/Cas9敲除载体。将其转入甘蓝型油菜“湘油15”中,并获得了4株成功编辑的植株,编辑成功率为21%。