研究背景:溶瘤病毒o HSV-1是当前肿瘤免疫治疗的一种手段,其最大的特点是能够在基因工程改造后特异性地在肿瘤细胞中复制而对正常细胞无杀伤作用。虽然o HSV-1能够感染大多数的肿瘤细胞,但不同肿瘤细胞对o HSV-1的敏感性差异较大,因此在面对不易被病毒感染的肿瘤细胞时,就需要开展联合治疗。本研究所用的组蛋白去乙酰化酶抑制剂（HDACi）帕比司他为一种有效的泛去乙酰化酶抑制剂,可以阻断多种癌症相关通路并参与调控与癌症进展有关的表观遗传事件。有研究表明,当组蛋白去乙酰化酶（HDAC）的活性被抑制后,能够在胶质瘤及鳞状细胞癌细胞中帮助病毒进行复制。因此,本研究尝试将o HSV-1与HDACi联用,并对其抑制肿瘤生长的效果进行研究。目的:探究o HSV-1和HDACi联合使用在体外对肿瘤细胞的杀伤性以及体内抗肿瘤治疗效果。为溶瘤病毒、表观遗传修饰因子和免疫检查点抑制剂联合治疗胶质瘤和鳞状细胞癌的临床方式提供一些新的线索。方法:1.免疫印迹实验验证HDACi能否抑制组蛋白去乙酰化酶的活化。2.HDACi预处理胶质瘤和鳞状细胞癌细胞后感染o HSV-1,细胞毒性实验以及病毒滴度实验检测细胞杀伤以及病毒滴度的情况。3.实时荧光定量PCR检测HDACi和o HSV-1联用后细胞中IFN-β、PML、PKR、STAT1等抗病毒基因及c GAS/STING通路部分基因的转录表达。4.构建鼠源的胶质瘤及鳞状细胞癌模型,观察HDACi和o HSV-1联合用药后肿瘤的进展及小鼠生存率的变化。结果:1.HDACi帕比司他能增强o HSV-1在人胶质瘤A172细胞和鳞状细胞癌SCC9细胞中的复制和细胞毒性。2.o HSV-1和帕比司他联用时,通过下调人胶质瘤A172细胞和鳞状细胞癌SCC9细胞中IFN-β、PML、PKR、STAT1等抗病毒基因及c GAS/STING通路部分基因的转录表达,增强了病毒复制。3.帕比司他可诱导人、鼠胶质瘤细胞和鳞状细胞癌细胞中PD-L1表达上调。4.在体内联合HDACi和携带PD-1抗体的o HSV-1治疗后,在小鼠胶质瘤CT-2A模型和鳞状细胞癌SCC7模型中具有显著的协同治疗效果,肿瘤进展缓慢。结论:o HSV-1与HDAC抑制剂帕比司他联用后,病毒的复制增强,并且有更强的细胞杀伤能力。其原因是两者联用时会下调细胞中的抗病毒基因如IFN-β、PML、PKR、STAT1等的转录表达,帮助病毒复制,同时可以上调PD-L1的表达帮助体内免疫细胞进行应答。通过动物模型的验证也证实了两者联用后能够显著抑制肿瘤的发展,提高生存率。为溶瘤病毒联合治疗胶质瘤和鳞状细胞癌的临床方式提供了一些新的线索。