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第一部分肿瘤出芽预测早期宫颈癌复发目的明确肿瘤出芽在早期宫颈癌术后复发风险预测中的作用。方法回顾性分析2008年1月至2014年12月我院根治性手术治疗的早期宫颈癌（FIGOⅠA2-ⅡA期）,复查HE切片,统计包括肿瘤出芽在内的临床病理参数;出芽定义为肿瘤浸润性最前端出现的单个肿瘤细胞或不超过5个细胞的小瘤巢,选取出芽密集区于20倍物镜（奥林巴斯BX51,视野面积0.95mm2）下计数。Wilcoxon秩和检验分析肿瘤出芽个数与宫颈癌侵袭性表型间的相关性。受试者工作特征（receiver operating characteristics,ROC）曲线检验肿瘤出芽个数对早期宫颈癌术后复发的预测价值,并选取临界值将研究人群分为低级别出芽（Low-grade tumor budding,LTB）组及高级别出芽（High-grade tumor budding,HTB）组。多因素Logistic回归分析影响早期宫颈癌盆腔淋巴结转移的独立危险因素;Cox比例风险回归模型分析影响早期宫颈癌复发和死亡的独立危险因素。Kaplan-Meier法绘制LTB组及HTB组无瘤时间生存曲线,Log-rank检验比较两组间复发风险差异。联合HTB及经典复发危险因素建立新的复发预测模型,Log-rank检验及ROC分析检验新建模型的预测效能。结果1.最终入选早期宫颈癌643例。2.早期宫颈癌中肿瘤出芽个数与肿瘤分化程度（P=0.008）、FIGO分期（P =0.004）、肿瘤大小（P=0.002）、间质浸润深度（P= 0.022）、血管淋巴管间隙浸润（P<0.001）及盆腔淋巴结转移（P<0.001）显著正相关。3.HTB是盆腔淋巴结转移（OR = 2.632,P=0.01）的独立危险因素;同时也是早期宫颈癌患者术后复发（HR = 4.711;950%CI:3.051-7.275;P<0.001）及死亡（HR= 2.880,P = 0.001）的独立危险因素。4.HTB联合经典复发危险因子共建立了 9个新的复发预测模型（称为Model 1-9）,其中Mode15采用HTB、肿瘤最大径≥4cm、浸润宫颈间质外1/3层以及淋巴管血管间隙浸润四项作为中危因子且定义满足任意两项为复发中危人群,其预测能力最强（ROC曲线AUC = 0.752）;与经典模型相比,此包含四项中危因素的新模型不仅AUC值更大（0.752 vs 0.667）,且敏感性（0.730 vs 0.656）及特异性（0.769 vs 0.679）均得以提升。结论1.肿瘤出芽与宫颈癌高侵袭表型相关。2.HTB是早期宫颈癌术后复发及死亡的独立危险因素。3.HTB、肿瘤最大径≥4cm、浸润宫颈间质外1/3层以及淋巴管血管间隙浸润组成的包含四个中危因素的新模型能精准地筛选复发危险人群,指导临床早期宫颈癌根治术后辅助治疗。第二部分SATB1经上皮间质转化促使宫颈癌肿瘤出芽的研究目的研究SATB1对宫颈癌肿瘤出芽的影响并探讨相关机制。方法1.选取2008年1月至2012年12月根治性手术治疗的FIGO IB1期宫颈癌组织制作组织芯片。免疫组织化学染色检测早期宫颈癌组织中SATB1表达,分析SATB1表达水平与肿瘤出芽个数间的相关性及其对预后的影响。2.短发夹RNA（shRNA）下调宫颈癌细胞株SATB1表达,建立稳转细胞株。EdU法检测宫颈癌细胞株增殖活性改变;Transwell实验检测宫颈癌细胞株侵袭及迁移能力改变。3.下调SATB1后:TagMan探针实时荧光定量法及Western blot检测经典上皮间质转化（EMT）相关因子的mRNA水平变化及蛋白水平变化;罗丹明标记的鬼笔环肽染色检测细胞骨架蛋白改变。4.免疫组织化学染色检测宫颈癌组织中EMT标志性因子E-cadherin的表达,Spearman’s rank相关分析检测E-cadherin表达水平与SATB1表达水平间的相关性。5.建立裸鼠皮下移植瘤模型;分析SATB1下调后对裸鼠皮下瘤体积、肿瘤出芽及侵袭能力的影响;免疫组织化学染色检测SATB1下调后皮下瘤组织中E-cadherin、Vimentin及Ki-67的表达水平变化。结果1.200例IB1期宫颈癌组织中SATB1阴性、弱阳性及强阳性的病例数分别为111（55.5%）、52（26%）及37（18.5%）。随着SATB1表达增强,宫颈癌中肿瘤出芽个数明显增多,两者呈正相关（r = 0.505;P<0.01）。生存分析显示SATB1阳性组复发及死亡风险更高（P<0.01）。2.SATB1下调后,Siha及Hela细胞的增殖活性、侵袭及迁移能力均显著下降。3.STAB1下调后,多个EMT相关因子mRNA及蛋白水平明显发生改变。其中,EMT标志性因子E-cadherin表达上调,转录因子Snail l及调控细胞结构的因子Vimetin表达明显下调。4.SATB1下调后,细胞形态呈现EMT逆向改变:由狭长转变为卵圆形,呈巢团状分布;胞浆内粗大的应力纤维减少消失,细胞微丝增多使细胞间粘附性增强。5.早期宫颈癌组织内E-cadherin表达随着SATB1表达增强而明显减弱,Spearman秩相关分析提示SATB1与E-cadherin表达呈明显负相关（r =-0.719,P<0.01）。6.体内实验证实SATB1下调后:皮下瘤体积显著下降;肿瘤的生长方式由侵袭性生长变为膨胀性生长,出芽消失;E-cadherin表达明显下调同时伴随着Vimentin表达上调,Ki-67增殖指数显著下降。结论1.宫颈癌组织中SATB1表达与肿瘤出芽个数正相关;SATB1表达提示不良预后。2.下调SATB1能够抑制宫颈癌细胞的增殖,减弱其侵袭及迁移能力。3.SATB1可能经EMT途径促使宫颈癌细胞出芽,从而促进宫颈癌的侵袭转移。