目的1.通过分析感染新型隐球菌(Cryptococcus neoformans,CN)病人的病案资料,探讨其诊治方式。2.初步建立临床新型隐球菌的(point-of-care,POC)即时检测方法。方法1.回顾性分析2015年2月至2018年8月天津市第一中心医院收治的38例新型隐球菌感染病人的病案资料,对其基础疾病、临床表现、实验室检查、治疗及转归情况进行分析。2.利用重组酶聚合酶扩增技术(recombinase polymerase amplification,RPA),针对新型隐球菌基因组的保守序列设计特异引物,初步建立新型隐球菌的简捷、快速、高效、灵敏的检测方法。结果1.38例患者均经病原学诊断,其中血液31例,脑脊液5例,病理组织2例。治疗方案:两性霉素B、5-氟胞嘧啶、氟康唑、伏立康唑或联合用药。38例患者中,转院1例,死亡3例,放弃治疗2例,好转出院32例。2.新型隐球菌的凝胶法RPA检测结果:通过对ATCC32609提取的基因组进行扩增和凝胶电泳检测,设计引物的扩增反应阳性;对提取的ATCC32609菌株基因组DNA以1:5、1:10、1:50、1:100、1:500、1:1000稀释,半定量检测该引物和试剂的灵敏度,1:1000稀释的模板DNA凝胶电泳仍可见新型隐球菌阳性条带。扩增产物测序结果在pubmed网站上通过blast比对,属于新型隐球菌编码核糖体RNA的DNA片段,比对结果符合率为100%;新型隐球菌的RPA对比实时荧光PCR,RPA法和oasig实时荧光PCR法在定性检测临床标本方面具有一致性。结论1.新型隐球菌常导致中枢神经系统感染,亦可引起全身多部位感染,应警惕非中枢神经系统隐匿性感染。早期病原学检测对疾病的诊治和预后十分重要,早期及时用药和联合用药者预后较好。2.通过实验证明了凝胶法RPA技术可以对新型隐球菌进行定性检测,所设计的引物具有高度特异性。