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芫花为中国特有的瑞香科植物,主要有效成分为植物中罕见的瑞香烷型二萜原酸酯类化合物,其中芫花酯甲对多种癌细胞系有较强的抑制活性,对DNA拓扑异构酶I的抑制作用是其抗癌的可能机理。芫花酯甲的化学结构与喜树碱类完全不同,属于新结构类型的DNA拓扑异构酶I抑制剂。 本文建立了芫花根中瑞香烷型二萜原酸酯类组分HPLC-UV标准指纹图谱,对主要色谱峰用LC-MS进行了归属,并对其中主要成分建立了定量分析方法,为不同产地、采收季节和人工栽培等原料药材的质量控制提供了科学依据。探讨了芫花酯甲提取工艺路线,选用石油醚回流提取,硅胶柱粗分离,制备型C18 HPLC纯化,分离得到高纯度芫花酯甲,收率为0.0143%,同时从芫花中首次分离得到芫花酯己。通过UV、IR、MS、1H-NMR、13CNMR和2D-NMR谱对芫花酯甲和芫花酯己进行了结构表征。 本文将芫花酯甲制成自组装纳米胶束水溶性注射液,并对质量分析方法进行了验证,考察了影响芫花酯甲注射剂稳定性的主要因素为pH值,pH在7.0～9.0范围内稳定性良好,pH小于6.0时,芫花酯甲原酸酯环易被酸催化为对DNA拓扑异构酶I无抑制活性的水合开环产物（m/z 666）,这也首次阐明了传统醋制芫花毒性降低的机理。体外溶血实验结果表明芫花酯甲注射液无溶血和红细胞粘集作用,可用于静脉注射。 芫花酯甲和芫花酯己对人黑色素瘤细胞A375有明显的抑制活性,IC50分别为5.50和6.90μM,对DNA拓扑异构酶I抑制IC50分别为40.0和38.0μM。药代动力学初步研究结果表明:芫花酯甲注射液家兔静脉注射给药,在体内符合双室开放模型C=2071.1e-0.632t+341.1e-0.0652t,分布相半衰期为1.1h,消除半衰期为10.6h;主要代谢物为芫花酯甲两个侧链被同时水解的分解产物（m/z 392）,未检出有芫花酯甲水合开环产物和C12位酯基被水解产物12-羟基瑞香毒素。尿中主要以上述代谢物形式排泄,而原型药物仅占0.8%,24h后未检测到原型药物。预研结果为动物正式药代动力学和临床药代动力学研究提供了依据。