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目的探讨二甲双胍联合奥沙利铂对人结肠癌细胞HCT-8迁移及侵袭的影响,并初步探究其可能的机制。方法体外培养人结肠癌HCT-8细胞。实验组加不同浓度二甲双胍(5、10、20、40 mmol/L)处理细胞,对照组加等量的PBS溶液,分别处理24、48、72 h,后检测IC50。将结肠癌HCT-8细胞随机分为4组(空白对照组、二甲双胍组、奥沙利铂组,联合用药组),分别用处于最适浓度的二甲双胍、奥沙利铂和二甲双胍+奥沙利铂处理细胞,对照组加以等量的PBS液,48小时后,以MTT法检测HCT-8细胞的增殖能力;将细胞接种于6孔板上,用不同药物处理细胞,以划痕实验检测细胞的迁移距离;将Matrigel胶平铺于Transwell小室底部的膜上,4℃冰箱储存备用,将经过不同药物处理的4组细胞分别接种于小室底部,以Transwell实验检测结肠癌细胞的侵袭能力;以Western blot实验检测不同药物处理组细胞基质金属蛋白酶(MMP-2、MMP-9)、血管内皮生长因子(VEGF)蛋白的表达量;以实时荧光定量PCR实验检测MMP-2 mRNA、MMP-9 mRNA的表达水平;将处于对数生长期的细胞分为两组,一组用20 mmol/L的二甲双胍+20μg/ml的奥沙利铂处理,另一组用含10%FBS的空白培养基培养,以Western blot实验检测联合用药组细胞中p65、p-65、MMP-9及MMP-2蛋白表达量的变化。将实验数据加以整理并进行统计学分析。结果MTT结果显示,培养24、48、72 h后不同浓度的二甲双胍对HCT-8细胞的存活率均有影响,并且影响呈剂量-时间依赖关系,且存在低浓度短时间内促进结肠癌细胞生长的现象。20 mmol/L二甲双胍干预48 h,细胞的存活率为50%,48 h IC50为20 mmol/L。培养48 h后,与对照组相比,不同药物处理均对HCT-8细胞增殖有抑制作用,且各组间增殖率存在差异,各组增殖率空白对照组(1.251±0.012),二甲双胍组(0.985±0.081),奥沙利铂组(0.620±0.043),二甲双胍+奥沙利铂组(0.477±0.048),(F=158.872)差异有显著性(P<0.05);与对照组比较,二甲双胍组、奥沙利铂组、二甲双胍+奥沙利铂组结肠癌细胞迁移能力显著降低,且各组间差异有统计学意义(P<0.05);二甲双胍+奥沙利铂组侵袭细胞数明显少于对照组、二甲双胍组、奥沙利铂组,差异有统计学意义(P<0.05);与对照组相比较,不同药物处理组MMP-2、MMP-9及VEGF蛋白表达量均下调,且各组间差异有显著性(P<0.05);与对照组比较,不同药物处理组MMP-2 mRNA、MMP-9 mRNA表达量均下调,且各组间差异有显著性(P<0.05);与对照组相比,两药联合组细胞中p-p65、MMP-2、MMP-9蛋白表达量下调,差异呈显著性(P<0.05),非磷酸化的p65蛋白表达量无明显差异。结论1二甲双胍以及二甲双胍联合奥沙利铂能够抑制结肠癌HCT-8细胞的迁移和侵袭并且能降低MMP-2、MMP-9、VEGF蛋白及MMP-2 mRNA、MMP-9 mRNA分子的表达量,联合用药组抑制作用更强。2二甲双胍联合奥沙利铂对人结肠癌细胞迁移与侵袭作用的影响与抑制p65磷酸化,阻断NF-κB通路的激活进而降低MMP-2、MMP-9蛋白的表达量有关。图6幅;表11个;参144篇。