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目的:非酒精性脂肪肝病(non-alcoholic fatty liver diseases,NAFLD)在全球范围内的高发病率,使得对NAFLD病理机制的研究亟待加强。本文比较了Ω-3和Ω-6多不饱和脂肪酸(polyunsaturated fatty acid,PUFA)对NAFLD的缓解作用。方法:高脂饮食(high fat diet)诱导C57小鼠NAFLD模型,另设同等含油量鱼油高脂饮食组、低脂饮食控制组和鱼油低脂饮食对照组,饲养24周后牺牲收集样品。比较各组实验动物血清TG、TCH、HDLC、LDLC水平和AST、ALT、SOD、GST酶活力;及动物体重、肝脏重量和形态、肝脏组织病理分析等。另BRL大鼠肝细胞作离体实验材料,比较几种PUFA缓解高浓度棕榈酸细胞毒性的作用差异:MTT实验检测细胞增殖活性;罗丹明123和DCFH-DA荧光染色分别检测线粒体膜电位和细胞内ROS浓度;生化检测细胞内GSH含量和SOD活力;流式细胞术检测细胞凋亡率;采用Real-time PCR检测FASN、UQCRQ的转录水平和细胞内线粒体数量;Western blot检测FASN、CPT1A、SLC25A20、PCK1基因表达;HPLC测定线粒体膜磷脂的组成,GC/MS检测线粒体膜脂肪酸组成。结果:与NAFLD模型组相比,含鱼油膳食能改善NAFLD肝脏脂质代谢异常和缓解氧化损伤;降低血清中总甘油三酯(triglyceride,TG)、总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇含量,而增加高密度脂蛋白胆固醇含量,以及降低谷丙转氨酶、谷草转氨酶、谷胱甘肽S-转移等肝酶活力。肝脏组织显示肝脂肪变性减轻。进一步细胞实验发现,与Ω-6PUFA(如ARA)相比,几种主要Ω-3PUFA具有增强肝细胞活力和脂质代谢能力,维持线粒体正常膜电位;减少细胞内活性氧自由基(reactive oxygen species,ROS)含量,增强线粒体功能的作用。Ω-3PUFA能调节脂肪酸代谢和其他重要代谢途径的基因表达,下调脂肪酸合酶(FASN)表达而增加了SLC25A20(肉碱脂酰转运体)和肉碱脂酰转酰酶(CPT1A)的表达;同时上调糖异生关键酶磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(PCK1)的表达。离体条件中,各种不同PUFA能有效地整合到线粒体膜磷脂中,改变线粒体膜磷脂中Ω-6PUFA/Ω-3PUFA比例及脂肪酸组成。结论:Ω-3PUFA能够改善细胞内氧化应激状态,增强线粒体功能,改变线粒体磷脂组成,缓解脂质毒性诱导的细胞凋亡。Ω-3PUFA可通过调节多个代谢途径活性而影响能量代谢和物质代谢,即在增强脂肪酸氧化的同时促进糖异生作用,可能通过增强磷酸戊糖途径及增加糖原合成和还原力生成。补充PUFA能改变线粒体膜磷脂中Ω-6PUFA/Ω-3PUFA比例及脂肪酸组成;从而影响线粒体膜结构和功能、线粒体膜蛋白活性以及生物活性物(如炎症因子)合成,进而增强了线粒体功能和缓解脂质毒性。为进一步深入研究Ω-3PUFA缓解NAFLD的机制奠定基础。