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副结核病(Paratuberculosis)是由禽分枝杆菌副结核亚种(Mycobacterium avium subsp Paratuberculosis,MAP)引起的危害严重的传染性疾病,该病在世界各国均有发生,在我国也是最常见的多发性疾病,对于该病的控制措施,只有少数国家采用检疫后扑杀的策略,但该策略并不适用于所有的国家和地区。目前,全世界只有商品化灭活疫苗,该苗能够减少病原体的排泄,但并不能完全阻断副结核菌感染,因此研发高效疫苗非常必要。本研究探索了两个多组分(MAP培养上清、MAP细胞壁)疫苗的功效,比较了沙门氏菌菌蜕(Ghost)佐剂和弗氏不完全佐剂(Incomplete Freund Adjuvant,IFA)对这些多组分疫苗的免疫增强效果,同时以MAP灭活苗+铝盐佐剂做对比,并对免疫后小鼠进行攻毒评价,以期筛选出免疫效果最佳的疫苗。实验结果表明,MAP细胞壁组在一免时就能产生较高水平的免疫效价,二免、三免后效价持续升高,且抗体水平明显高于MAP培养上清组和MAP灭活苗组;MAP培养上清组在二免后抗体水平明显高于PBS对照组,而MAP灭活苗组在三免后抗体水平明显高于PBS对照组。三免后MAP细胞壁组IL-2、IFN-γ、IL-4、IL-10分泌量明显高于MAP培养上清组和MAP灭活苗组;MAP培养上清组和MAP灭活苗组IL-2、IFN-γ、IL-4、Il-10分泌量明显高于PBS对照组,表明MAP细胞壁组引起的免疫应答要强于MAP培养上清组和MAP灭活苗组。三免后的攻毒结果显示,MAP细胞壁免疫组小鼠的肝脏、脾脏、小肠中MAP的荷菌量要少于MAP培养上清组和MAP灭活苗组,且MAP细胞壁组中IFA佐剂组要好于Ghost组,表明MAP细胞壁组对感染MAP小鼠的保护效果要好于MAP培养上清组和MAP灭活苗组。而且,IFA组的抗体水平要高于沙门氏菌Ghost组,说明MAP细胞壁组、MAP培养上清组与佐剂IFA结合效果要优于沙门氏菌Ghost组。本研究为副结核病新型疫苗的研制奠定基础。