【摘 要】
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背景和目的小檗碱是一种生物碱,具有多种药理活性,已广泛应用于各种疾病的治疗领域。目前已经有几项行为学的研究表明小檗碱可能是治疗药物成瘾的潜在药物,但其所涉及的神经机制仍不清楚。哺乳动物腹侧被盖区（VTA）是一个中脑区域,它作为一个综合中心,对几乎所有成瘾药物的激励和激励作用进行调控。然而,小檗碱对VTA脑区神经元的影响知之甚少。本课题研究了小檗碱对腹侧被盖区多巴胺（DA）和γ-氨基丁酸（GABA）
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背景和目的小檗碱是一种生物碱,具有多种药理活性,已广泛应用于各种疾病的治疗领域。目前已经有几项行为学的研究表明小檗碱可能是治疗药物成瘾的潜在药物,但其所涉及的神经机制仍不清楚。哺乳动物腹侧被盖区（VTA）是一个中脑区域,它作为一个综合中心,对几乎所有成瘾药物的激励和激励作用进行调控。然而,小檗碱对VTA脑区神经元的影响知之甚少。本课题研究了小檗碱对腹侧被盖区多巴胺（DA）和γ-氨基丁酸（GABA）神经元放电和突触功能的影响,为揭示小檗碱治疗药物成瘾的可能神经机制提供实验证据。材料与方法1、实验动物:本实验采用周龄为2-7周的C57BL/J6野生型（WT）小鼠。2、含有VTA的脑片准备:对照小鼠脑图谱制备含有VTA的250μm的冠状切片,用于脑片膜片钳的记录。3、脑片细胞附着（cell-attach）模式记录膜片钳和全细胞（whole-cell）模式记录:将含有VTA的大脑切片放在相差干涉显微镜下,在高倍镜下利用脑片膜片钳进行细胞附着模式记录或者全细胞模式记录腹侧被盖区DA神经元和GABA神经元的电生理数据,并检测小檗碱对其作用。4、数据统计分析:软件pClamp10.8用于膜片钳数据采集,使用clapmfit 10.8软件用于数据分析。其他软件如Excel、spss20、graphpad和prism 8被用于其他数据分析。采用配对t检验对给药前后的数据进行统计分析。数据表示为平均值±标准误差（平均值±S.E.M.）。结果1、小檗碱能抑制腹侧被盖区的DA神经元的放电。2、小檗碱能提高腹侧被盖区的DA神经元的抑制性突触后电流（sIPSCs）的频率但对sIPSCs的振幅没有影响。3、小檗碱能增强腹侧被盖区的GABA神经元的放电。4、小檗碱能降低腹侧被盖区的GABA神经元的抑制性突触后电流（sIPSCs）的频率但对sIPSCs的振幅没有影响。5、小檗碱对腹侧被盖区的DA神经元和GABA神经元的兴奋性突触后电流（sIPSCs）的频率和振幅没有影响。6、小檗碱能提高腹侧被盖区的GABA神经元在双脉冲刺激下的诱发的抑制性突触后电流（eIPSCs）的比值,提示突触前抑制。7、小檗碱能抵消腹侧被盖区的GABA神经元在尼古丁诱导下的放电减弱效应。8、小檗碱能抵消腹侧被盖区的GABA神经元在尼古丁诱导下的抑制性突触后电流的频率增强的效应。9、小檗碱能减少乙酰胆碱（Ach）诱导的腹侧被盖区的GABA神经元的放电频率增强的效应。结论实验结果表明,小檗碱可抑制小鼠腹侧被盖区DA能神经元的放电活动,其机制可能是通过增强腹侧被盖区GABA能神经元的放电,从而增加了腹侧被盖区GABA能神经元对多巴胺能神经元的抑制,并且小檗碱增强腹侧被盖区GABA能神经元的放电是通过其突触前抑制而实现的,这可能是其拮抗多种成瘾药物的神经机制。小檗碱这种增强腹侧被盖区GABA能神经元对DA神经元的抑制的机制也在去除尼古丁引起的DA神经元兴奋中得到进一步的验证。
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