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目的：研究胸苷酸合成酶基因（TYMS）编码区开放阅读框（ORF）及3’端非翻译区（3’-UTR）多态性在急性白血病（AL）儿童和正常儿童中的等位基因频率和基因型分布特征，分析其与中国汉族儿童AL发生风险即易感性的关系。回顾性统计分析大剂量甲氨蝶呤（HD-MTX）在治疗儿童急性淋巴细胞白血病（ALL）时的毒副作用发生情况，分析ALL儿童TYMS多态性与HD-MTX引起的毒副作用之间的相关性。方法：采用RT-PCR-变性梯度凝胶电泳（DGGE）结合DNA直接测序技术，检测108例AL儿童和121例正常对照儿童的TYMS ORF和3’-UTR多态性及基因突变，分析其等位基因频率及各基因型在两组人群中的分布，并进行病例、对照优势比分析以研究TYMS各多态性与AL发生之间的关系。108例AL儿童中有85例ALL，后者有52例接受了HD-MTX治疗，按照美国国立癌症研究所的第3版常规毒性判定标准（NCICTCAE, version3.0）对患儿用药前后的一般反应、皮肤黏膜损害、骨髓抑制等临床表现和血尿常规、肝肾功能、心肌酶、心电图等进行回顾性统计，并分析HD-MTX毒副作用与各TYMS多态性之间的关系。结果：1.在中国汉族儿童TYMS ORF中仅筛查到2个单核苷酸多态性（SNP），分别为A381G和T349C。TYMS A381G（Glu127Glu）在AL患儿及正常对照儿童中的等位基因频率分别为13.0%和12.4%，等位基因频率在两组中差异无显著性意义（P>0.05），提示其与AL易感性无相关性。此外，在中国正常人群中确定了T349C（Phe117Leu）的存在及其等位基因频率为1.2%。2.在中国汉族儿童TYMS3’-UTR检测到2个SNP（C1100T、A1170G）和1494del6/ins6。AL组和对照组儿童TYMS C1100T位点CC、CT、TT基因型频率分别为10.2%、40.7%、49.1%和12.8%、37.6%、49.6%，Ｃ和Ｔ等位基因频率为30.6%、69.4%和31.6%、68.4%；A1170G位点AA、AG、GG基因型频率分别为47.2%、38.0%、14.8%和41.9%、42.7%、15.4%，A和G等位基因频率为66.2%、33.8%和63.2%、36.8%；1494del6/ins6多态性+6bp/+6bp、+6bp/-6bp、-6bp/-6bp基因型频率分别为8.3%、44.5%、47.2%和7.8%、42.2%、50.0%，+6bp和-6bp等位基因频率为30.6%、69.4%和28.9%、71.1%。此3个TYMS多态性的基因型和等位基因频率在两组间的分布差异无统计学意义（P>0.05）。3.连锁不平衡及单倍型频率分析发现，TYMS C1100T、A1170G和1494del6/ins6多态性之间均存在连锁不平衡(P<10-4)，其中尤以C1100T位点和1494del6/ins6连锁不平衡最强。对预期发生频率高的四种单倍型进行分析发现，它们在AL组和对照组中的分布无显著性差异（P>0.05）。4.对75例ALL儿童的TYMS各多态性与临床特征如年龄、性别、危险度等进行分析发现，TYMSA1170G与ALL儿童性别相关，与AA基因型相比，携带等位基因G者男孩数约是女孩的3倍（OR=3.05,95%CI=1.14~8.19, P=0.023）。TYMS A381G、C1100T和1494del6/ins6多态性与ALL儿童的临床特征之间无相关性（P>0.05）。5.对52例接受HD-MTX化疗的ALL儿童毒副反应统计分析发现，骨髓抑制出现较广泛，发生率为92.3%；肝功能损害为40.4%；消化道反应为32.7%；口腔黏膜损害25.0%；心脏毒性11.5%，这些毒副反应大部分较轻微。6. TYMS A1170G的基因型与中性粒细胞减少的发生相关，GG基因型具有保护作用，其使中性粒细胞减少的发生危险降低（OR=0.07，95%CI=0.01~0.64，P=0.026）。A381G、C1100T和1494del6/ins6多态性与HD-MTX的毒副作用均无相关性（P＞0.05）。结论：1.本研究对108例AL儿童和121例正常对照儿童共计229例中国儿童TYMS ORF的多态性及基因突变筛查仅检测到2个SNP（A381G和T349C），确定了它们在AL患儿及正常对照儿童中的等位基因频率及基因型分布。TYMSA381G与AL发生风险可能不相关；据我们所知，首次确定了中国人群TYMS存在T349C多态位点及其等位基因频率，此SNP的功能及与AL的相关性尚需扩大样本量或功能分析的进一步研究。2.本研究确定了TYMS3’-UTR的3个多态性位点C1100T、A1170G和1494del6/ins6在此次研究的中国汉族AL儿童中的分布特征，并发现C1100T和1494del6/ins6之间存在强连锁不平衡；这3个TYMS多态性与中国汉族儿童AL的发生无明显关联。3. TYMS A1170G多态性可能与ALL儿童性别相关。4. HD-MTX治疗儿童ALL时毒副作用较为常见，但多轻微，其中不同程度的骨髓抑制和肝功能损害最为常见，其次消化道反应、口腔黏膜损害等，大部分患儿对这些毒副作用可耐受。5. TYMS A1170G多态性可能与ALL儿童的HD-MTX毒副作用相关，1170GG基因型可能降低MTX导致的中性粒细胞减少的发生危险。