【摘 要】
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氧化应激是指机体体内产生的活性氧等自由基超过了机体清除能力,导致的机体内环境氧化-抗氧化系统失衡现象。大量研究证明氧化应激可导致衰老及哮喘、过敏和糖尿病等多种疾病,有必要增加人体抗氧化防御能力,以更好地维护人体健康。乳酸菌(Lactic acid bacteria,LAB)安全、稳定且无毒,使用乳酸菌菌株清除过量的自由基,抑制氧化损伤以及预防或治疗相关的疾病是一种潜在可行的选择。本研究主要从中国传
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氧化应激是指机体体内产生的活性氧等自由基超过了机体清除能力,导致的机体内环境氧化-抗氧化系统失衡现象。大量研究证明氧化应激可导致衰老及哮喘、过敏和糖尿病等多种疾病,有必要增加人体抗氧化防御能力,以更好地维护人体健康。乳酸菌(Lactic acid bacteria,LAB)安全、稳定且无毒,使用乳酸菌菌株清除过量的自由基,抑制氧化损伤以及预防或治疗相关的疾病是一种潜在可行的选择。本研究主要从中国传统发酵蔬菜中分离了乳酸菌菌株,通过体外抗氧化及益生特性检测筛选出了1株目标菌株,并通过建立D-半乳糖诱导的小鼠氧化应激模型对其抗氧化特性进行了研究,为开发抗氧化的产品奠定理论基础。主要结果如下:(1)从36个地区的收集的41份样品中共分离得到481株乳酸菌菌株,通过测定分离菌株的DPPH·自由基清除能力、OH·自由基清除能力、还原能力、Fe2+螯合能力和脂质过氧化抑制率筛选出8株抗氧化能力强的乳酸菌菌株,分别为SC12、SC34、GX235、YN295、JX306、GX328、GZ394、GZ430。其中乳酸菌菌株JX306表现出较强的体外抗氧化能力,对DPPH·的清除能力为37.29%,还原能力为83.95%,脂质过氧化抑制活性为28.14%,Fe2+螯合能力为54.38%,羟自由基清除能力37.90%。(2)通过胆盐耐受能力、模拟胃液和肠液的耐受性、细胞疏水性、自凝集能力等益生指标的测定显示,菌株JX306综合性质较好,在模拟胆汁的存活率为78.28%,模拟胃液的存活率为53.05%,模拟肠液的存活率为42.07%,细胞疏水性为86.82%和自凝集能力为45.52%。因此,JX306被选定为目标菌株进行下一步试验,经形态学、生理生化和16S rDNA序列分析,将菌株JX306鉴定为Lactobacillus fermentum。(3)通过D-半乳糖诱导建立了小鼠氧化应激模型,利用L.fermentum JX306进行的体内抗氧化实验结果显示该菌株能够显著降低氧化应激小鼠的血清、肾脏和肝脏组织中丙二醛(MDA)水平,提高谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性和总抗氧化能力(T-AOC)。同时,L.fermentum JX306能够显著上调与抗氧化相关的过氧化物酶1(Prdx1),谷胱甘肽还原酶(Gsr),谷胱甘肽过氧化物酶(Gpx1)和硫氧还蛋白还原酶(TR3)基因的转录水平。组织病理学观察显示L.fermentum JX306可以有效抑制D-半乳糖对小鼠肝和肾造成的氧化损伤。(4)16S rDNA测序分析小鼠的肠道微生物组成,结果表明,L.fermentum JX306能够改善Firmicutes/Bacteroidetes比例,有利于促进Lactobacillus,uni.Lachnospiraceae,Ruminococcaceae,Roseburia,Butyricicoccus和Blautia这些有益菌的产生,有助于改善肠道微生物组成,从而增强了机体的抗氧化应激的能力。
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