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心肌纤维化是心肌重构的重要的病理变化,主要表现为细胞外基质蛋白表达增加,胶原的沉积影响心肌收缩舒张,导致心功能障碍,严重的甚至会导致心力衰竭。环状RNA(circular RNA,circ RNA)是闭合环状的非编码RNA,可通过调控基因表达来参与生物学过程和疾病的发生发展进程。本文研究环状RNA circ RNA＿001131对心肌纤维化的调控作用和作用机制。目的:研究环状RNA circ RNA＿001131对大鼠心肌成纤维细胞(cardiac fibroblasts,CFs)纤维化表型的调控作用及分子机制。方法:采用Masson三色染色对腹主动脉缩窄术(abdominal aortic coarctation,AAC)诱导心肌重构的大鼠心肌进行胶原含量的检测。实时荧光定量PCR(RT-q PCR)检测AAC大鼠心肌及血管紧张素II(AngiotensinⅡ,AngⅡ)诱导的大鼠CFs中circ RNA＿001131和其宿主基因Pten(phosphatase and tensinhomolog,磷酸酶和张力蛋白同源物)的表达。利用放线菌素D和RNase R实验检测circ RNA＿001131的RNA稳定性。利用重组circ RNA＿001131腺病毒(recombinant circ RNA＿001131 adenovirus,r Ad-circ RNA＿001131)感染大鼠CFs,检测CFs中纤维化相关基因Ⅰ型胶原α1(Col1a1)、Ⅲ型胶原α1(Col3a1)和平滑肌肌动蛋白α2(Acta2)的m RNA和蛋白表达变化。双荧光素酶报告基因实验、RNA pull-down实验、反义RNA纯化(RNA antisense purification,RAP)实验验证circ RNA＿001131与微小RNA mi R-25-3p的结合作用。m RNA表达谱芯片检测过表达circ RNA＿001131和mi R-25-3p后CFs的基因表达变化。双荧光素酶报告基因实验验证mi R-25-3p与潜在靶基因BTG抗增殖因子2(BTG anti-proliferation factor 2,Btg2)之间的结合作用。RT-q PCR验证Btg2在过表达circ RNA＿001131或过表达mi R-25-3p后CFs中表达水平。检测过表达Btg2后纤维化相关基因及磷酸化的Smad3(p-Smad3)、磷酸化Akt(p-Akt)、磷酸化的NF-κBp65(p-NF-κBp65)的表达。检测过表达circ RNA＿001131后p-Smad3、p-Akt、p-NF-κBp65的表达。验证mi R-25-3p及si-Btg2是否可以逆转circ RNA＿001131抑制心肌纤维化的作用。结果:Masson染色结果显示,AAC大鼠心肌出现的明显的纤维化。RT-q PCR结果证实circ RNA＿001131和Pten在AAC大鼠心肌和AngⅡ诱导大鼠CFs中表达增强。利用r Ad-circ RNA＿001131感染大鼠CFs而过表达circ RNA＿001131可显著抑制大鼠CFs中纤维化相关基因Col1a1、Col3a1和Acta2的表达。双荧光素酶报告基因实验、RNA pull down实验和RAP实验证实circ RNA＿001131和mi R-25-3p之间存在结合作用。m RNA表达谱芯片发现Btg2在过表达circ RNA＿001131后表达上调而在过表达mi R-25-3p后表达下调,RT-q PCR实验也证实Btg2在过表达circ RNA＿001131后表达上调而在过表达mi R-25-3p后表达下调,双荧光素酶报告基因实验证实mi R-25-3p与Btg2之间的结合作用。同时证实沉默Btg2可促进纤维化相关基因的表达,而在过表达Btg2后,纤维化相关基因表达下调、p-Smad3表达降低,而过表达circ RNA＿001131后p-Smad3表达也降低,证实circ RNA＿001131和Btg2通过抑制Smad3的激活而发挥抑制纤维化作用。而沉默Btg2或过表达mi R-25-3p可以逆转circ RNA＿001131对大鼠CFs中纤维化相关基因表达的抑制作用。结论:Circ RNA＿001131在心肌纤维化中表达增强,通过结合mi R-25-3p并增加Btg2的表达来发挥抑制心肌纤维化的作用。