非小细胞肺癌患者上皮细胞钙粘蛋白-连环素复合物基因异常的初步研究

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目的:1.研究非小细胞肺癌(NSCLC)患者组织标本中上皮细胞钙粘蛋白-连环素复合物(E-Cadherin/catenins,E-CD/cat)成分E-CD、β-cat的基因异常情况。2. 探讨E-CDmRNA 在肺癌患者中的表达及其临床病理学意义。研究方法:1:采用PCR-SSCP及序列分析检测了24例NSCLC组织标本及肺癌细胞株的E-CD、β-cat的基因异常。2:采用RT-PCR方法检测了24例NSCLC组织标本及肺癌细胞株的E-CDexon8-9mRNA的表达情况。结果:1.应用PCR-SSCP技术,24例非小细胞肺癌组织中2例存在E-CD基因单链泳动变位,均发生在exon9上,β-catenin exon3在所有标本中均未出现单链泳动变位。2.在SPC-A1细胞株中E- CD exon8出现单链泳动变位;在A549细胞株中出现β-catenin exon3单链泳动变位,3.序列分析发现:1例标本exon9在编码50位点处插入T碱基(50+T),在82位点处插入T碱基(82+T), 89位点处插入C碱基89+C。另一例exon9在编码94位点处发生C→T的置换,在编码171位点处出现G碱基的缺失(171-G),在190位点处出现C碱基的缺失(190-C)。4. A549细胞株中β-catenin exon3在编码556位点处发生G→A的置换,在编码557位点处发生C→G的置换,即GCT→AGT。5.RT-PCR结果显示10例(41.7%)NSCLC E-CDexon8-9mRNA表达减少或缺如。两例肺腺癌细胞株的E-CDexon8-9表达均减少6. RT-PCR半定量分析显示:NSCLC患者E-CD mRNA表达异常与非小细胞肺癌淋巴结转移相关显著(P〈0.05),与组织分化程度相关,低分化肺癌表达异常频率较高、中分化高(P〈0.05),而与非小细胞肺癌组织学类型相关,鳞癌表达异常频率较腺癌高(P<0.05)。<WP=7>结论:1.非小细胞肺癌患者存在E-CD基因异常,基因异常主要集中在外显子9,以插入或缺失突变为主。 2. β-catenin exon3在非小细胞肺癌组织中没有发现基因异常的改变,1例细胞株有β-catenin exon3突变。3.3NSCLC患者E-CD mRNA表达异常与非小细胞肺癌淋巴结转移、组织分化程度、组织学类型相关。淋巴结转移组异常频率高于无淋巴结转移组、低分化肺癌表达异常频率较高、中分化高、鳞癌表达异常频率较腺癌高(P<0.05)。4.E-CD基因改变与表达异常可能与非小细胞肺癌的发生、发展有关。
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