论文部分内容阅读
CD147/HAb18G分子是一种高度糖基化的跨膜蛋白，属于免疫球蛋白超家族成员，参与细胞与细胞的粘附。肿瘤细胞表面的CD147可刺激肿瘤周围成纤维细胞产生MMPs。本实验欲从肿瘤自身及其周围环境两方面研究CD147与MMPs在肿瘤浸润、转移中的作用。 一 CD147与MMPs在肝癌细胞中的表达及相关性 用流式细胞仪检测正常肝细胞QZG及不同肝癌细胞系（BEL-7402、QGY-7404、SMMC-7721、HHCC、HHCC-9204）中CD147的表达；酶谱法分析其产生MMPs的含量及活性；用免疫组化ABC法结合激光共聚焦显微镜，观察CD147与MMP-2在人肝癌HHCC细胞中的定位。结果：正常肝细胞株QZG中CD147表达阴性，其余5株肝癌细胞系CD147表达阳性；MMP-2和MMP-9在QZG和肝癌细胞系中均表达，但在肝癌细胞系中表达明显增高；MMP-9以酶原和活性形式表达，MMP-2仅以酶原形式表达；经统计学分析 ＄＠贸僵土管项士故夭CD147和 MMPS表达成正相关；CD147与 MMP－2在HHCC细胞中成免疫反应阳性，CD 47反应产物位于核膜和胞质，MMPZ反应产物位于胞质。结论：肝癌细胞自身也分泌 MMP上；CD 47可作为判断肝癌细胞具备高侵袭转移潜能的标志。 H CD147MAb18G在肝癌组织中的提纯及功能鉴定 用 mAbHAbl与 CNBr活化的 SePHarose 4B交联，制备亲和层析柱，从新鲜肝癌组织匀浆中提纯HAb18G；毛细管电泳及Westernblotting分析纯化结果和特异性；酶谱法鉴定HAbl8G刺激人成纤维细胞分泌MMPS的功能。结果：经亲和层析纯化后，HAbl8G纯度达96％；与mAbHAbls特异性反应；酶谱法显示HAbl8G刺激人成纤维细胞分泌MMPS的量及种类有明显变化。结论：亲和层析法获得了高纯度、特异性的肝癌膜相关抗原HAb SG，纯化的HAbl8G具有细胞外基质金属蛋白酶诱导因子门 EMMPIUN儿D 47）的功能。