论文部分内容阅读
目的:梅尼埃病(MD)的典型病理特征是内淋巴积水(EH)。醛固酮能诱导EH形成,但其与MD的关系尚未阐明。因此,本实验通过检测豚鼠耳蜗组织中Af9蛋白的表达情况,并且分析醛固酮对耳蜗功能及Af9表达的调控作用,从而探讨醛固酮与Af9分子在内淋巴积水中的作用机制。方法:将30只豚鼠随机分为两组,对照组腹腔注射0.05ml生理盐水,实验组腹腔注射醛固酮0.1mg.kg-1.d-1(0.05ml),各5天。1月后通过听性脑干反应(ABR)检测内耳的功能学改变;应用苏木素-伊红染色(HE)检测两组内耳组织的形态学改变,利用免疫组织化学(IHC)及免疫荧光(IF)检测Af9蛋白在耳蜗组织中的定位表达,采用Western blot和荧光定量PCR方法从蛋白和mRNA水平上检测醛固酮作用前后Af9分子表达水平的变化。结果:醛固酮作用后,ABR提示实验组(23.33±2.38 d B SPL)听力阈值较对照组(18.33±2.73 dB SPL)升高(P<0.05)。HE证实实验组豚鼠耳蜗内淋巴积水率达到73%,而对照组未见内淋巴积水形成。IHC及IF显示Af9蛋白在血管纹、前庭膜、螺旋缘、Corti器、螺旋神经节均有表达,并且Western blot显示实验组耳蜗Af9蛋白表达量(0.75±0.15)低于对照组(1.06±0.08);荧光定量PCR显示实验组耳蜗Af9mRNA(0.36±0.07)表达量低于对照组(1.00±0.00),差异均有统计学意义(P<0.05),表明醛固酮在蛋白及mRNA水平上均能有效下调Af9分子的表达。结论:耳蜗组织中存在与Na+代谢相关的Af9分子,醛固酮对内淋巴的调控可能与耳蜗Af9分子密切相关,即醛固酮通过下调Af9的表达来参与内淋巴代谢,形成内淋巴积水,进而影响耳蜗功能。