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目的：
前期研究发现，大鼠尾静脉注射TPL后在肝脏中有非常高的分布，故建立小鼠肝原位移植瘤模型，研究TPL对小鼠肝原位移植模型的抗肿瘤作用及其药动学，验证TPL对原位肝癌是否比皮下移植瘤具有更好的抗肿瘤作用，为将来的临床应用提供试验依据。
方法：
1、四甲基偶氮唑蓝法检测TPL对HepG2、H22细胞增殖的抑制作用，流式细胞仪检测上述两种细胞的凋亡率，并通过细胞摄取实验讨论TPL的动力学模型。
2、建立肝原位移植瘤模型，通过观察组织的病理切片、测定肝肾功能的相关指标及分析脏器指数等，对肝原位移植瘤模型进行分析。
3、以小鼠肝原位移植瘤和皮下移植瘤及裸鼠肝原位移植瘤为模型，评价TPL在体内的抗肿瘤作用。
4、应用LC/MS法检测TPL在小鼠肝原位移植瘤模型及皮下移植瘤模型血浆及组织中的浓度，同时对肝原位移植瘤小鼠的药动学进行研究，考察TPL在肝脏中具有较高的分布及验证TPL的抗肿瘤作用。
结果：
1、MTT结果表明，TPL对HepG2、H22细胞都有较强的增殖抑制作用，随着药物浓度的增加，其抑制作用呈现剂量依赖性。流式细胞仪测定细胞凋亡的实验数据表明TPL对上述两种细胞的作用呈剂量依赖性。通过细胞摄取实验发现TPL在上述两种细胞内过程均为一级动力学模型。
2、用细胞悬液注射法建立的小鼠肝原位移植瘤模型，其接种后肿瘤的大小呈时间依赖性增长，成瘤率为100%。通过病理切片观察，发现肝原位移植瘤小鼠的心、脾、肺、肾与正常小鼠相比均未见明显的病理变化，而肝脏的损伤程度随时间逐渐加重。通过对肝、肾功能相关指标的检测数据可得，接种后5、10天，肝原位移植瘤AST、ALT与正常对照组相比具有显著性差异。从脏器指数的分析结果得出肝原位移植瘤小鼠与正常小鼠相比，肝脏的指数呈时间依赖性增加。
3、在小鼠肝原位移植瘤模型中，TPL低剂量（0.1mg/kg）对小鼠肝原位移植瘤模型的抑瘤率为66.9%（P＜0.05），TPL中剂量（0.2mg/kg）的抑瘤率为74.6%（P＜0.05），TPL高剂量（0.3mg/kg）的抑瘤率为60.9%（P＜0.05）。在小鼠皮下移植瘤模型中，TPL低剂量（0.1mg/kg）对小鼠皮下移植瘤的抑瘤率为32.6%（P＜0.05），TPL中剂量（0.2mg/kg）的抑瘤率为38.9%（P＜0.05），TPL高剂量（0.3mg/kg）的抑瘤率为38.1%（P＜0.05）。在裸鼠肝原位移植瘤模型中，TPL低剂量（0.1mg/kg）对裸鼠肝原位移植瘤模型的抑瘤率为41.0%(P＜0.05)，TPL中剂量（0.2mg/kg）的抑瘤率为58.3%(P＜0.05)，TPL高剂量（0.3mg/kg）的抑瘤率为50.5%(P＜0.05)。其中相同剂量的TPL对肝原位移植瘤的抑瘤率大于皮下移植瘤，另外，TPL中剂量组对原位移植瘤的抑瘤率均大于高剂量组。
4、尾静脉注射不同剂量TPL20min后，测得肝原位移植瘤模型小鼠血浆中的血药浓度均大于皮下移植瘤小鼠；各组织中测得TPL的浓度从大到小的顺序分别为肝、肝原位组中的瘤块、皮下瘤、脾、肺、肾，且各组肝中的浓度均远远大于其它器官。另外，皮下移植瘤小鼠血浆、肝脏、瘤块的药物浓度均小于原位移植瘤小鼠，且TPL对荷瘤小鼠的抑瘤率与浓度呈正比，因而可解释TPL对肝原位移植瘤具有较大抑瘤率的原因。
5、药动学参数结果中，肝原位组血浆样品的MRT(0-120min)和AUC(0-120min)值分别为（15.78±4.06）min、（7047.3±319.2）min·μg/L，半衰期为（19.4±4.7）min，均大于对照组，说明TPL在肝原位移植瘤小鼠体内的消除时间长于对照组；而各组织样品中的AUC(0-120min)，从大到小依次为：肝、瘤、脾、肺、肾、心，其中肝原位组肝的MRT(0-120min)和AUC(0-120min)值均大于正常组，可能是由于肝原位移植瘤的浸润生长破坏正常肝细胞，使TPL的代谢降低，故其在肝原位小鼠体内的药物浓度较高。
结论：
1、体外细胞实验中，TPL对HepG2及H22细胞均有较强的抑制作用，呈时间、剂量依赖性。通过细胞摄取实验发现TPL在上述两种细胞内过程均为一级动力学模型。
2、成功建立肝原位移植瘤模型，成瘤率为100%。在一定剂量范围内（≤0.2mg/kg），TPL对小鼠、裸鼠肝原位移植瘤模型的抑瘤作用呈剂量依赖性。而中剂量TPL的抑瘤率均大于高剂量。另外，相同剂量的TPL对肝原位移植瘤的抑瘤率大于皮下移植瘤。
3、尾静脉注射相同剂量的TPL后，肝原位移植瘤组中的血浆、肝脏及瘤中的浓度均大于对照组及皮下移植瘤组，可能是因为肝原位移植瘤的浸润生长破坏正常肝细胞，延长了TPL在小鼠体内的消除时间。因而，TPL对肝原位移植瘤和皮下移植瘤的药物代谢动力学及药效学的作用不同，为肝原位移植瘤组具有较高的抑瘤率打下物质基础，为TPL治疗肝癌提供实验依据。
前期研究发现，大鼠尾静脉注射TPL后在肝脏中有非常高的分布，故建立小鼠肝原位移植瘤模型，研究TPL对小鼠肝原位移植模型的抗肿瘤作用及其药动学，验证TPL对原位肝癌是否比皮下移植瘤具有更好的抗肿瘤作用，为将来的临床应用提供试验依据。
方法：
1、四甲基偶氮唑蓝法检测TPL对HepG2、H22细胞增殖的抑制作用，流式细胞仪检测上述两种细胞的凋亡率，并通过细胞摄取实验讨论TPL的动力学模型。
2、建立肝原位移植瘤模型，通过观察组织的病理切片、测定肝肾功能的相关指标及分析脏器指数等，对肝原位移植瘤模型进行分析。
3、以小鼠肝原位移植瘤和皮下移植瘤及裸鼠肝原位移植瘤为模型，评价TPL在体内的抗肿瘤作用。
4、应用LC/MS法检测TPL在小鼠肝原位移植瘤模型及皮下移植瘤模型血浆及组织中的浓度，同时对肝原位移植瘤小鼠的药动学进行研究，考察TPL在肝脏中具有较高的分布及验证TPL的抗肿瘤作用。
结果：
1、MTT结果表明，TPL对HepG2、H22细胞都有较强的增殖抑制作用，随着药物浓度的增加，其抑制作用呈现剂量依赖性。流式细胞仪测定细胞凋亡的实验数据表明TPL对上述两种细胞的作用呈剂量依赖性。通过细胞摄取实验发现TPL在上述两种细胞内过程均为一级动力学模型。
2、用细胞悬液注射法建立的小鼠肝原位移植瘤模型，其接种后肿瘤的大小呈时间依赖性增长，成瘤率为100%。通过病理切片观察，发现肝原位移植瘤小鼠的心、脾、肺、肾与正常小鼠相比均未见明显的病理变化，而肝脏的损伤程度随时间逐渐加重。通过对肝、肾功能相关指标的检测数据可得，接种后5、10天，肝原位移植瘤AST、ALT与正常对照组相比具有显著性差异。从脏器指数的分析结果得出肝原位移植瘤小鼠与正常小鼠相比，肝脏的指数呈时间依赖性增加。
3、在小鼠肝原位移植瘤模型中，TPL低剂量（0.1mg/kg）对小鼠肝原位移植瘤模型的抑瘤率为66.9%（P＜0.05），TPL中剂量（0.2mg/kg）的抑瘤率为74.6%（P＜0.05），TPL高剂量（0.3mg/kg）的抑瘤率为60.9%（P＜0.05）。在小鼠皮下移植瘤模型中，TPL低剂量（0.1mg/kg）对小鼠皮下移植瘤的抑瘤率为32.6%（P＜0.05），TPL中剂量（0.2mg/kg）的抑瘤率为38.9%（P＜0.05），TPL高剂量（0.3mg/kg）的抑瘤率为38.1%（P＜0.05）。在裸鼠肝原位移植瘤模型中，TPL低剂量（0.1mg/kg）对裸鼠肝原位移植瘤模型的抑瘤率为41.0%(P＜0.05)，TPL中剂量（0.2mg/kg）的抑瘤率为58.3%(P＜0.05)，TPL高剂量（0.3mg/kg）的抑瘤率为50.5%(P＜0.05)。其中相同剂量的TPL对肝原位移植瘤的抑瘤率大于皮下移植瘤，另外，TPL中剂量组对原位移植瘤的抑瘤率均大于高剂量组。
4、尾静脉注射不同剂量TPL20min后，测得肝原位移植瘤模型小鼠血浆中的血药浓度均大于皮下移植瘤小鼠；各组织中测得TPL的浓度从大到小的顺序分别为肝、肝原位组中的瘤块、皮下瘤、脾、肺、肾，且各组肝中的浓度均远远大于其它器官。另外，皮下移植瘤小鼠血浆、肝脏、瘤块的药物浓度均小于原位移植瘤小鼠，且TPL对荷瘤小鼠的抑瘤率与浓度呈正比，因而可解释TPL对肝原位移植瘤具有较大抑瘤率的原因。
5、药动学参数结果中，肝原位组血浆样品的MRT(0-120min)和AUC(0-120min)值分别为（15.78±4.06）min、（7047.3±319.2）min·μg/L，半衰期为（19.4±4.7）min，均大于对照组，说明TPL在肝原位移植瘤小鼠体内的消除时间长于对照组；而各组织样品中的AUC(0-120min)，从大到小依次为：肝、瘤、脾、肺、肾、心，其中肝原位组肝的MRT(0-120min)和AUC(0-120min)值均大于正常组，可能是由于肝原位移植瘤的浸润生长破坏正常肝细胞，使TPL的代谢降低，故其在肝原位小鼠体内的药物浓度较高。
结论：
1、体外细胞实验中，TPL对HepG2及H22细胞均有较强的抑制作用，呈时间、剂量依赖性。通过细胞摄取实验发现TPL在上述两种细胞内过程均为一级动力学模型。
2、成功建立肝原位移植瘤模型，成瘤率为100%。在一定剂量范围内（≤0.2mg/kg），TPL对小鼠、裸鼠肝原位移植瘤模型的抑瘤作用呈剂量依赖性。而中剂量TPL的抑瘤率均大于高剂量。另外，相同剂量的TPL对肝原位移植瘤的抑瘤率大于皮下移植瘤。
3、尾静脉注射相同剂量的TPL后，肝原位移植瘤组中的血浆、肝脏及瘤中的浓度均大于对照组及皮下移植瘤组，可能是因为肝原位移植瘤的浸润生长破坏正常肝细胞，延长了TPL在小鼠体内的消除时间。因而，TPL对肝原位移植瘤和皮下移植瘤的药物代谢动力学及药效学的作用不同，为肝原位移植瘤组具有较高的抑瘤率打下物质基础，为TPL治疗肝癌提供实验依据。