背景孤独症谱系障碍（ASD）是影响儿童健康的重要公共卫生问题,给家庭和社会带来极大的精神压力和经济负担。动物研究显示给予大鼠脑室内注射丙酸可诱发ASD相关症状,而丁酸处理孤独症型小鼠会改善其社交缺陷;细胞实验发现丙酸和丁酸分别对神经胶质细胞呈现出神经毒性和神经保护效应。然而既往少量人群研究结论却不一致,且主要局限于乙酸、丙酸和丁酸与ASD关系的探讨。基于不同的遗传背景,饮食习惯以及肠道菌群在不同人群中的差异,本研究拟探讨10种不同类型短链脂肪酸（SCFAs）及总SCFAs与中国6～9岁ASD儿童的关联性。目的1、探索高效液相色谱（HPLC）测定粪便样本中10种SCFAs的最佳条件,建立检测粪便中SCFAs的优化方法。2、比较广州市6～9岁ASD儿童与正常儿童粪便中SCFAs的差异,分析SCFAs与ASD的关联,为ASD的干预提供线索。3、评估ASD儿童症状以及胃肠道（GI）症状严重程度,比较轻-中度ASD与重度ASD、有GI症状与无GI症状ASD儿童粪便SCFAs的差异,为改善ASD儿童症状以及GI症状提供理论依据。方法1、采用HPLC检测粪便中10种SCFAs,确定方法的线性范围,最佳洗脱条件,加标回收率,日内差和日间差以及方法检出限和定量限。2、在中山大学儿童青少年心理行为发育研究中心招募6～9岁ASD儿童,广州市各幼儿园及小学招募6～9岁正常儿童,按性别及年龄（±0.5岁）进行1:2配对,面对面收集研究对象一般资料、三日膳食、食物频率、ASD症状以及胃肠道症状情况。收集儿童新鲜粪便,采用优化的HPLC方法检测粪便中SCFAs。采用配对t检验和协方差分析比较两组SCFAs的差异,独立样本t检验比较轻-中度ASD与重度ASD、有GI症状与无GI症状ASD儿童粪便SCFAs的差异。根据对照组SCFAs的浓度和不同类型SCFAs占总SCFAs百分比由低至高分为三组,并将分界点应用到ASD组,将第一组作为参照组,单因素与多因素条件Logistic回归分析SCFAs与ASD的患病风险,纳入模型的混杂因素包括年龄、性别、BMI、分娩方式、是否母乳喂养、能量摄入量、膳食纤维摄入量和父母受教育程度。考虑到多重比较会增加Ⅰ类错误的概率,因此P值用Bonferroni进行校正。结果1、本研究成功优化了 HPLC检测粪便SCFAs的方法,该方法在4～5000μmol/L的浓度范围内具有良好的线性,样本加标回收率为83%～117%;日内和日间精密度分别为2.4%～9.8%和 3.9%～11.4%;方法检出限和定量限分别为0.003～1.153 μmol/L 和 0.012～3.844μmol/L。2、本研究共纳入ASD儿童45人,正常儿童90人。ASD组总短链脂肪酸,乙酸,丙酸和丁酸浓度分别为 112.8±42.5,59.0±22.4,22.8±11.2,23.0±12.5μmol/g,对照组浓度分别为 100.7±26.4,51.2±15.4,20.1±6.50,20.7±7.26μmol/g;ASD 组乙酸,丙酸,丁酸所占百分比为52.7%,20.1%,19.9%,对照组所占百分比为50.8%,20.1%,20.1%,但两组差异并无统计学意义（P＞0.05）;对照组丁烯酸,2-甲基丁酸,异戊酸和4-甲基戊酸显著高于ASD组。矫正混杂因素后,相对于低浓度组,高浓度组总短链脂肪酸,乙酸,丙酸和丁酸与ASD患病风险无关,OR值分别为1.31（95%CI0.45-3.79）,1.98（95%CI0.67-5.87）,1.64（95%CI0.62-4.36）,0.97（95%CI 0.32-2.93）。高百分比组乙酸,丙酸和丁酸与ASD患病风险也无任何关联。与百分比处于最低三分位者,2-甲基丁酸及异戊酸处于最高三分位者ASD的患病风险分别降低 68%（OR=0.32,95%CI0.10-0.99）和 71%（OR=0.29,95%CI0.09-0.98）。3、ASD儿童GI症状检出率为46.7%,无GI症状组丁酸含量较高（26.2μmol/g vs.19.0μmol/g,P= 0.034）。轻-中度ASD与重度ASD组SCFAs含量无显著性差异。结论1、优化的HPLC法具有较低的检出限,良好的回收率和精密度,适用于大批量粪便样本中10种短链脂肪酸的检测。2、ASD组与对照组粪便中总短链脂肪酸,乙酸,丙酸和丁酸含量无显著性差异,与ASD患病风险无任何关联,高百分比的2-甲基丁酸和异戊酸能降低ASD患病风险,但经多重比较矫正后,未发现显著关联。3、ASD儿童GI症状检出率为46.7%,有GI症状组ASD儿童丁酸含量较低,但P值经矫正后,未发现两组间存在显著差异。ASD严重程度与粪便SCFAs含量无关。