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本研究为探索特种水生蔬菜刺苦草无性繁殖的有效途径,对组织培养过程中的消毒方法、培养基种类、外植体选用、光照温度处理、生长素和细胞分裂素的选择等方面进行了比较研究。着重研究芽尖组织培养程序的最佳培养基配方,建立刺苦草组织培养技术体系。结果表明:1.以刺苦草根状茎的侧芽作为外植体,进行消毒药品的选择表明先用70%酒精消毒30s,再用0.1%HgC12加吐温20(3～5滴)消毒12min,消毒效果最好;2.刺苦草的芽尖的初代组织培养中,MS培养基比N6培养基生长效果和成活率要好,因此选择MS为基本培养基;加入琼脂量为7.5g左右,固态培养基培养;3.不同器官作外植体,在相同条件下对根状茎、叶片、芽尖进行诱导,芽尖形成的愈伤组织结构紧密,颜色偏绿;芽尖的启动d数最短5d,叶片次之7d,根状茎启动最慢15d;芽尖成活率最高污染率最低分别为77.5%和20%,且易培养出完整植株;叶片、茎段成功地诱导出愈伤组织,诱导率极低,但未实现从愈伤组织的植株再生;因此外植体最好选择根状茎侧芽的芽尖;4.以芽尖作为试验材料,组织培养的最佳光照条件为遮光处理2周后(1000LX)再采用正常光照(1500LX)较好;最佳培养温度为20℃左右;5.细胞分裂素浓度高于生长素则促进细胞分化,在6BA和NAA相互作用时,芽尖初代成活率随着6BA浓度的增加而降低。6BA0.2mg/L+NAA1.0mg/L时,转绿率和分化率达到最高为92.8%和85.7%;6BA和IBA相互作用时,IBA和6BA浓度的变化对其成活率影响较小。此时选择MS+6BA2.0mg/L+IBA1.0mg/L为好,其成活率和转绿率最大达到71.4%和75%。即初代培养最佳组合是MS+6BA0.2mg/L+NAA1.0mg/L,或MS+6BA2.0mg/L+IBA1.0mg/L。6.相同IBA或NAA条件下,6BA为2.0 mg/L时的增殖系数分别低于1.0 mg/L时的增殖系数,且MS+6BA1.0mg/L+IBA0.5mg/L和MS+6BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L为两处理的最佳水平。MS+6BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L条件下,30d、60d、90d的繁增殖倍数分别高于其他于处理,达到1.60、2.22和4.25,即适合植株增殖的培养基配方最佳组合为:MS+6BA1.0mg/L+NAA0.1 mg/L。7.MS+6BA+NAA处理下,6BA为0,NAA为0.1mg/L,生根率最高,达到51%,平均根条数达到最大为4.8。MS+6BA+IBA处理下,生根率随着IBA的增加而减少,在6BA为0,IBA0.5mg/L时生根率达到最大值41%、平均生根数达到5.0。不同IBA和NAA浓度水平下,根的长度都不超过1.7cm,且平均根长都随着6BA浓度的增加而减小。相同6BA浓度水平下NAA处理比IBA处理生根率大,生根条数也少。且随着NAA浓度的逐渐增加,不利于根的发育。生根培养的最佳培养基为MS+6BA0.05mg/L+NAA0.1。