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背景乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤之一,每年世界上大约有100万妇女被诊断为乳腺癌,其中70%～85%的晚期患者最终会发生骨转移[1]。尸检检出率更高[3],据调查,在乳腺癌致死病例中,90%的患者已发生骨转移。马钱子碱(Brucine)为中药马钱子的主要化学成分之一,为具有吲哚型结构的生物碱,具有抗癌、镇痛、促进骨修复及增强机体免疫力等作用,一直作为“以毒攻毒”治疗恶性肿瘤的常用药物,单方或配伍其它药来抑制肿瘤和缓解癌性疼痛。目的本实验以马钱子碱作用于裸鼠乳腺癌骨转移模型,观察马钱子碱的抑瘤作用,并采用RT-PCR方法分析马钱子碱对乳腺癌骨转移相关因子MMP-2、CXCR4、RANKL、OPG mRNA表达的调节作用。方法培养人乳腺癌细胞株MDA-MB-231,取对数生长期细胞制成单细胞悬液。20只雌性Balb/c-nu/nu裸鼠麻醉后,无菌条件下,局部骨内+皮下注射乳腺癌单细胞悬液共0.2 ml,复制乳腺癌骨转移模型。20只荷瘤裸鼠随机分为4组:马钱子碱高剂量组(A)、中剂量组(B)、低剂量组(C)和对照组(D),分别予马钱子碱6.90、3.45、1.73 mg·kg -1(1/10、1/20、1/40 LD50 ip)和生理盐水腹腔注射,每日一次,连续8天。观察各组裸鼠生存状态和肿瘤生长情况,绘制肿瘤生长曲线,评价抑瘤率;病理切片观察肿瘤细胞形态和骨转移情况;RT-PCR检测并比较各组肿瘤组织中,骨转移相关因子MMP-2、CXCR4、RANKL、OPG的mRNA表达情况。结果①肿瘤生长曲线和抑瘤率:马钱子碱高剂量组(A)、中剂量组(B)、低剂量组(C)裸鼠生存状态良好,骨转移引起的活动障碍较轻,肿瘤生长均受到不同程度的抑制,生长曲线较对照组(D)迟缓,各组的抑瘤率分别为A组61.4%、B组50.5%、C组17.5% (P<0.05);而对照组(D)裸鼠有出现活动障碍、瘫痪、消瘦和精神萎靡,肿瘤体积较大。②病理切片观察到:各组均见乳腺癌骨转移,马钱子碱实验组(A、B、C组)癌细胞异型性均较对照组(D)轻,部分癌细胞形态不规则,在高剂量组(A)可见到癌细胞变性和坏死。③RT-PCR结果显示:与对照组比较,马钱子碱各剂量组MMP-2、CXCR4、RANKL mRNA的表达量均下降(P<0.05),OPG mRNA的表达量增加,OPG /RANKL比值增加(P<0.05)。结论马钱子碱能抑制荷瘤裸鼠的肿瘤生长,减轻骨损伤。其机制可能是通过调节MMP-2、CXCR4、RANKL、OPG等骨转移相关因子的表达,抑制乳腺癌骨转移。