现已认识到，肺癌的发生、发展和转归是一个极其复杂的多阶段、多基因调控异常的过程，有多种生物分子发生变化，包括原癌基因的激活，抑癌基因的失活，使细胞无限增殖，导致癌变。随着分子生物学和分子遗传学的研究进展，人们越来越注意到细胞周期失控在肿瘤发生发展中的作用。P16-Cyclin D1-Rb途径在G₁期调控中起关键作用，P16的功能缺陷、Cyclin D1的过表达或Rb的突变或缺失都将破坏这一途径和细胞周期调控的稳态平衡，导致肿瘤的发生。到目前为止，非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer,NSCLC）中P16、Cyclin D1、Rb的改变的研究已有较多报道，但报道结果颇不一致。增殖细胞核抗原（proliferation cell nuclear antigen，PCNA），是真核细胞染色体DNA复制所必须的组成成分，其合成表达与细胞增殖周期有关，PCNA增殖指数（proliferative index，PI）是一种简便易行的判断肿瘤细胞增殖状况的指标。P16、Cyclin D1、Rb三项联合检测较少，探讨它们与PI关系的研究甚为少见。 本实验借助免疫组织化学技术，对NSCLC中P16、Cyclin D1、Rb蛋白表达及与细胞增殖的关系进行研究，探讨它们之间的相互关系及与NSCLC的发生发展生物学行为的相关性，深入理解P16、Cyclin D1、Rb表达的改变在NSCLC中的重要意义，从而为NSCLC的诊断、治疗方案的设计提供新的思路和依据。 材料与方法：本实验收集88例NSCLC手术切除标本存档蜡块（1995-1999年），取自郑州大学第一、二临床医学院。标本均经10％福尔马林固定，石蜡包埋。其中男性60例，女性28例，年龄33～72岁，平均年龄57.1岁；鳞癌63例，腺癌25例；临床分期按1997年国际抗癌联盟（UICC）TNM分期标准，Ⅰ～Ⅱ期48例，Ⅲ～Ⅳ期40例。术前均未经化疗或放疗。取正常肺组织20例作对照。应郑州大学2003届硕士学位论文P16、eyelin DI、Rb在非小细胞肺癌中表达的改变及其意义用免疫组织化学SABC法或SP法检测全部标本中P16、Cyclin Dl、Rb、PCNA的表达情况，并计数PCNA增殖指数（PD。采用SPSS10.0软件包进行统计分析，应用尹检验，t检验及相关性检验。检验水准。二0.05。 结果:1.P16蛋白表达缺失率为51.1%（45/88），根据组织学分类，分化程度，淋巴结转移及临床病理分期分组，各组间P16表达差异无显著性（办0.05）;2.Cyclin DI表达率为52.3%（46/ 88），Cyelin Dl表达在鳞癌与腺癌、I一11期与111一IV期之间差异无显著性（外0.05），高分化与中低分化、有与无淋巴结转移之间差异有显著性护<。.05）;3 .Rb表达缺失率为21 .6%（19/88），根据临床病理特征分组各组间Rb表达差异均无显著性（玲0.05）;4.P16与Rb表达呈负相关，Cyclin Dl与Rb表达呈正相关，P16与Cyclin Dl表达无相关关系;5 .Cyclin Dl（+）与Cyclinnl。)组、Rb（+）与RbC)组pCNA增殖指数分别为45.5士15.6，27.0士21.6，30.8士17.1，58.1士19.2，组间差异有显著性（P<0 .01），Cyclin Dl阳性表达，Rb表达缺失表现为较高的细胞增殖活性，P16（+）与P16（一）组间PCNA增殖指数分别为39.5士18.7，34.0士22.5，差异无显著性（几0.05）。 结论:1 .P16基因改变在NsCLC发生中起重要作用，是早期分子事件，P16表达与肿瘤类型、临床病理分期、肿瘤分化程度及淋巴结转移无明显相关。因此，pl6基因改变是NSCLC早期诊断的有用指标。2.Cyclin Dl过表达与肿瘤分化程度及淋巴结转移密切相关，在不同组织学类型和临床病理分期组别间差异无显著性。Cychn Dl改变与NSCLC的发生关系密切，并可能为NSCLC的治疗方案设计提供依据。3 .Rb基因改变不是NSCLC发生发展的重要机制，仅在部分病例中起作用，Rb表达与组织学类型、临床病理分期、肿瘤分化程度及淋巴结转移无关。P16与Rb的改变可以作为区分NSCLC和SCLC的方法之一。4.P16与Rb表达呈负相关，P16和Rb作用于细胞周期和肿瘤抑制的单一途径，存在负反馈回路。Cyclin Dl与Rb表达呈正相关，Cychn Dl的表达与Rb的磷酸化构成一个反馈环。5.Cyclin Dl阳性表达、Rb表达缺失表现为较高的细胞增殖活性，P16状态与增殖指数无明显相关，Cyclin Dl、Rb改变在NSCLC肿瘤细胞增殖中起关键作用，可能在预后估计上有一定意义。6.联合检测P16、cyclin Dl、Rb表达的改变在提示NSCLC的生物学行为，指导临床诊断治疗上有重要意义。