论文部分内容阅读
目的:通过观察组织型转谷氨酰胺酶(tTG)在实验性糖尿病大鼠肾组织中的表达变化,探讨其在糖尿病肾病(DN)中的可能作用。方法:1)Wistar 大鼠尾静脉注射链脲佐菌素(STZ)制备 DN 模型,72小时后用快速血糖仪测血糖,其中>16.7mmol/L 的大鼠入选实验组,对照组注射同等剂量的枸橼酸缓冲液。分别于注射 STZ 后第 30 天、60天、90 天和 120 天时断颈处死实验组大鼠 5 只、对照组 3 只。切取上下极肾皮质部位组织做成标本。2)大鼠处死 24 小时前用代谢笼留取 24 小时尿,离心后用 ELISA测定 24 小时尿微量白蛋白定量。3)用 HE 染色和 PASM 染色作肾脏病理学观察。4)采用免疫组织化学方法(石蜡切片)和间接免疫荧光方法(冰冻切片)分别检测可溶性 tTG 和不溶性 tTG 蛋白的表达。5)提取肾脏皮质总 RNA,RT-PCR 技术检测 tTG 的 mRNA 表达。结果:1)随着模型时间的延长,实验组大鼠 24 小时尿微量白蛋白定量逐渐增加,而对照组间 24 小时尿微量白蛋白定量无明显变化。2)HE 和 PASM 染色显示,随着模型天数增加实验组大鼠肾组织中肾小球体积逐渐增大,系膜基质逐渐增多;第 90 天和 120 天时还可见到系膜基质 K-W 结节形成,部分肾小管上皮细胞呈空泡变性。3)免疫组化结果显示,可溶性 tTG 主要在肾小管上皮细胞的胞浆