论文部分内容阅读
第一部分原发性免疫性血小板减少症患者外周血调节性T细胞中miRNA基因表达谱的分析及验证目的：前期研究证实CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞（Treg）参与了原发性免疫性血小板减少症（primary immune thrombocytopenia, ITP）的免疫发病机制。本研究通过分析ITP患者Treg细胞中miRNA基因表达谱，探讨miRNA是否参与了ITP中Treg的免疫调控。方法：选取苏州大学附属第三医院常州市第一人民医院收治的初诊ITP患者21例及正常对照者18例，应用免疫磁珠分选技术分选出ITP患者及正常对照者外周血Treg细胞；提取Treg中总RNA，应用miRBase18.0数据库的芯片探针微阵列芯片技术及Volcano Plot filtering软件分析ITP患者及对照者Treg细胞中miRNA表达谱；筛选出两组Treg细胞中存在差异性表达的miRNA；应用荧光实时定量PCR技术进一步验证差异性表达的相关miRNA。结果：ITP患者与正常对照组Treg细胞内存在差异表达的miRNA共502个，其中244个表达水平上调，258个表达水平下调；选择表达下调的miR-155-5p、miR-146b-5p、miR-142-3p；应用荧光实时定量PCR技术进一步验证， ITP患者组Treg细胞中miR-155-5p、miR-146b-5p、miR-142-3p基因表达水平均显著低于正常对照组，结果有显著性差异(P<0.03；P<0.01；P<0.02)；miR-155-5p、miR-146b-5p、miR-142-3p之间表达水平无明显相关性。结论：与正常对照者比较，ITP患者外周血Treg细胞内miRNA基因存在差异性表达；其中miR-155-5p、miR-146b-5p、miR-142-3p基因表达水平显著性下降，提示miRNA可能参与了ITP患者中Treg细胞的免疫调控，可能与ITP免疫发病机制存在一定的相关性。第二部分大剂量地塞米松冲击治疗原发性免疫性血小板减少症患者的临床疗效目的：观察大剂量地塞米松（HD-DXM）冲击治疗ITP患者短期临床疗效。方法：我院收治的81例ITP患者，初诊69例，分为两组：A组36例，予HD-DXM40mg d-1静滴4天，连用4天为一疗程；B组33例，口服常规剂量泼尼松1mg kg-1d-1，连用4周后作为对照。A组HD-DXM一疗程结束后，治疗有效的32例患者分为2个亚组，A1组17例，予以小剂量泼尼松10mg d-1维持治疗；A2组15例，不接受维持治疗。复治患者12例（C组），予HD-DXM一疗程治疗后行脾切除手术；结果：治疗后第5天，A组血小板的中位数显著高于B组（79×109/L vs.47×109/L，P<0.01）。治疗后第14天，A1组血小板上升患者的比例显著高于A2组（58.8%vs.33.3%, P<0.05），C组患者顺利完成腹腔镜脾脏切除术。结论：HD-DXM治疗初诊ITP患者短期疗效明显优于泼尼松，冲击治疗后小剂量泼尼松的维持治疗可巩固疗效。HD-DXM可应用于ITP患者脾脏切除术前的急症处理。