【摘 要】
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根结线虫是一种严重危害农作物生长的植物寄生线虫,对世界各国的农业生产造成了非常严重的危害。本研究以南方根结线虫为靶标,首先研究了多粘类芽胞杆菌KM2501-1和枝芽胞杆菌
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根结线虫是一种严重危害农作物生长的植物寄生线虫,对世界各国的农业生产造成了非常严重的危害。本研究以南方根结线虫为靶标,首先研究了多粘类芽胞杆菌KM2501-1和枝芽胞杆菌1A00493的离体抑杀线虫活性,并利用顶空固相微萃取和气质联用(SPME-GC-MS)的方法对KM2501-1产生的挥发性有机化合物进行了分离和鉴定。其次,研究了其在温室盆栽实验中防治南方根结线虫的效果。此外,研究了两株菌对小鼠的急性毒性作用,评价了其作为生防菌株应用的安全性。研究成果如下:1.KM2501-1和1A00493对南方根结线虫的离体抑杀效果评价:体外生测实验证明两株菌的发酵液在不同稀释度下对南方根结线虫J2期幼虫都有杀虫活性,稀释至1/4浓度时,作用24 h的死亡率超过50%;且对线虫卵囊孵化具有明显抑制作用;两株菌发酵滤液在高浓度时,都有驱离根结线虫的作用,在低浓度时,具有吸引根结线虫的作用;两株菌除了具有触杀根结线虫的活性,在三孔平皿中的实验发现,两株菌产生的挥发性物质也具有非接触杀线虫的活性。离体生测实验结果说明两株菌不仅对不同阶段的线虫具有抑杀作用,并且具有多种作用方式。采用顶空固相微萃取和气相质谱联用(SPME-GC-MS)的方法对KM2501-1产生的具有杀线虫活性的挥发性有机化合物进行分离和鉴定。测定结果发现10种挥发性有机化合物,主要为酮类、醇类、苯酚类、酸类、吡嗪类等等,其中有4种已经被报道对根结线虫具有杀虫活性,其他的6种是否是具有杀线虫活性,有待进一步的实验验证。2.KM2501-1和1A00493的温室实验效果评价:温室盆栽实验发现两株菌的发酵滤液和菌悬液均具有很好的防治根结线虫的效果,且处理浓度越大,防治效果越好,其中KM2501-1的l×浓度发酵液上清(CF)生防效果最显著,根结系数降到了0.80(P<0.05),防治效果达到82.81%,1A00493的菌悬液(BS)原液生防效果最好,处理后根结系数降低为2.00(P<0.05),防治效果达到56.52%;同时,两株菌发酵滤液和菌悬液处理促进了番茄植株的生长,番茄的根长、根鲜重、苗鲜重等指标都有增长,KM2501-1 1×浓度的BS对番茄苗鲜重增重幅度为68.72%,1A00493的BS原液处理番茄苗增重67.99%。良好的温室防效展现了其作为生防菌剂应用的潜力。3.KM2501-1和1A00493对小鼠的急性毒理实验:通过小鼠急性经口毒性试验、急性经呼吸道毒性试验和急性注射毒性试验,评价了两株菌对哺乳动物的生物安全性,为该菌在农业生产病害防治中的安全性提供依据。对于三种染病途径的毒性评价分别采用灌胃、鼻腔滴注、静脉注射方式一次性给药,观察小鼠的临床表现并测定小鼠的体重和脏器系数。结果表明,两株菌发酵液各剂量以三种给药方式处理,对小鼠的生长发育没有造成不良影响,实验小鼠没有出现明显中毒症状,也无一例死亡现象发生。与对照相比小鼠体重变化没有显著性差异(P>0.05),脏器系数的测定结果与对照组比较没有显著性差异(P>0.05),各脏器解剖没有出现病变。研究结果表明,两菌发酵液对小鼠安全无毒副作用,可应用于农业生产病害的防治。
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