【摘 要】
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目的1.探究临床上治疗糖尿病周围神经病变的常用中药方剂;明确黄芪桂枝五汤治疗糖尿病周围神经病变的疗效特点;2.探究黄芪桂枝五物汤对高糖诱导下施旺细胞的保护作用以及与内质网应激IRE1α/ASK1/JNK相关信号分子的关系,进一步证实黄芪桂枝五物汤治疗糖尿病周围神经病变的科学依据。方法1.理论研究:收集各数据库近20年当代医家治疗糖尿病周围神经病变的中医医案,采用spss 25软件对医案中的中药方剂
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目的1.探究临床上治疗糖尿病周围神经病变的常用中药方剂;明确黄芪桂枝五汤治疗糖尿病周围神经病变的疗效特点;2.探究黄芪桂枝五物汤对高糖诱导下施旺细胞的保护作用以及与内质网应激IRE1α/ASK1/JNK相关信号分子的关系,进一步证实黄芪桂枝五物汤治疗糖尿病周围神经病变的科学依据。方法1.理论研究:收集各数据库近20年当代医家治疗糖尿病周围神经病变的中医医案,采用spss 25软件对医案中的中药方剂经行频数分析;收集各数据库建库以来黄芪桂枝五物汤治疗糖尿病周围神经病变随机对照实验,采用Rev Man 5.3软件对进行系统性评价分析;2.实验研究:将施旺细胞分为空白组（Con:25mmol/L葡萄糖+无药对照血清）、高糖组（HG:200mmol/L葡萄糖+无药对照血清）、黄芪桂枝五物汤组（HQGZ:200mmol/L葡萄糖+10mmol/L黄芪桂枝五物汤血清）、甲钴胺组（JGA:200mmol/L葡萄糖+10mmol/L甲钴胺血清）、SP600125抑制剂组（SP:200mmol/L葡萄糖+25μmol/LSP600125抑制剂血清）。（1）采用CCK-8法检测不同浓度的葡萄糖干预48h后施旺细胞的存活率;（2）采用Western blotting法检测施旺细胞内质网应激IRE1α/ASK1/JNK信号通路蛋白的表达;（3）采用PCR法检测施旺细胞凋亡相关蛋白Caspase3、9的表达;（4）采用ELISA法检测施旺细胞的炎症因子IL-6、IL-10的表达。结果1.理论研究结果:（1）收集到7首治疗糖尿病周围神经病变的中药方剂,余为自拟方。通过频次分析后得知,其中前三位其次为黄芪桂枝五物汤（40次）占35%;补阳还五汤（35次）占31.25%,;益气活血通痹汤（13次）占11.6%;（2）系统性评价共纳入10项随机对照试验,研究对象975例,结果得出黄芪桂枝五物汤合用西药治疗糖尿病周围神经病变在临床总有效率、中医临床症状、正中神经传导、腓总神经传导等方面均优于单纯使用西药常规治疗;2.实验研究结果:（1）与Con组相比葡萄糖浓度为200mmol/L干预48h后,施旺细胞存活率明显降低（P＜0.05）,故本实验选取200mmol/L为高糖干预浓度;（2）内质网应激IRE1α/ASK1/JNK蛋白的表达量:与Con组相比,HG组IRE1α/ASK1/JNK蛋白表达均显著上调（P＜0.01,P＜0.05,P＜0.01）;与HG组相比,HQGZ组、JGA组、SP组蛋白表达均显著下调（P＜0.05）;与HQGZ组相比,JGA组蛋白表达显著上调（P＜0.05）;（3）促炎因子IL-6d表达量:与Con组相比,HG组表达显著增高（P＜0.05）;与HG组相比,HQGZ组、JGA组、SP组表达显著降低（P＞0.05,P＞0.05,P＜0.01）;与HQGZ组相比,JGA组表达显著增高（P＜0.05）;抑炎因子IL-10的表达量:与Con组相比,HG组表达显著降低（P＜0.05）;与HG组相比,HQGZ组、GA组、SP组表达增高（P＞0.05、P＜0.01、P＜0.01）;与HQGZ组相比,JGA组表达降低（P＞0.05）;（4）凋亡蛋白Caspase3、9的表达量:与Con组相比,HG组表达量显著增高（P＜0.01）;与HG组相比,HQGZ组、JGA组、SP组表达量显著降低（P＜0.01）;与HQGZ组相比,JGA组表达量显著增高（P＜0.01）。结论1.现代临床医家常用黄芪桂枝五物汤、补阳还五汤治疗糖尿病周围神经病变;2.系统性评价结局提示,黄芪桂枝五物汤能改善糖尿病周围神经病变患者的临床症状,提高临床总有效率、正中神经传导、腓总神经传导;3.内质网应激IRE1α/ASK1/JNK参与了糖尿病周围神经病变的发病过程,高糖干预可诱导施旺细胞上调内质网应激IRE1α/ASK1/JNK相关蛋白、凋亡蛋白及炎症因子的表达,促进了细胞凋亡,加重对施旺细胞的损伤;4.黄芪桂枝五物汤含药血清通过下调内质网应激IRE1α/ASK1/JNK相关信号分子、凋亡蛋白及炎症因子的表达,有效保护高糖干预下的施旺细胞,综合作用优于甲钴胺。
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