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目的:1.分析 CD8+CD103+常驻记忆性 T（Tissue-resident memory,Trm）细胞在胃癌患者组织中的浸润及其临床关联性。2.研究CD8+CD103+Trm细胞在胃癌患者组织中的表型及其功能特征3.探讨胃癌组织中CD8+CD103+Trm细胞功能下降的机制。方法:1.收集105例胃癌患者的术后病理切片（肿瘤组织切片、及配对的非肿瘤正常组织切片）,进行免疫组织化学双重染色,检测组织中CD8+CD103+Trm细胞的数目,并分析其与临床分期、淋巴转移、神经侵袭、病理分化程度、脉管侵袭、肿瘤大小及其肿瘤侵袭深度等临床病理特点的相关性。2.收集54例胃癌患者手术切除新鲜组织,经酶消化后进行流式细胞术染色与检测,分析胃癌患者组织中CD8+CD103+Trm细胞的比例与数目、表型和功能。3.ELISA检测胃癌肿瘤组织中TGF-β1蛋白水平,并分析其与CD8+CD103+Trm细胞表达颗粒酶B、穿孔素的相关性;体外重组人TGF-β1内因子刺激培养CD8+T细胞,分析其对CD8+CD103+Trm细胞功能的影响。结果:1.分析CD8+CD103+Trm细胞在胃癌患者组织中的浸润及其临床关联性。1.1收集胃癌患者的组织标本进行免疫组织化学双重染色,高倍镜下随机计数3-5个视野,统计CD8+CD103+Trm细胞的数目并比较组间差异。结果显示:CD8与CD103双阳性细胞的数目在胃癌组织和正常组织中并无明显统计学差异（37/HPF vs.33/HPF,P＞0.05）,根据流式细胞检测分析,结果显示:与正常组织相比,胃癌患者肿瘤组织中CD8+CD103+Trm细胞频率显著下降（67.6%vs.78.2%,P＜0.05）;然而,以每106个细胞进行均一化处理时,CD8+CD103+Trm细胞数目在胃癌组织与正常组织中并无统计学差异（9332/106vs.7698/106,P＞0.05）。1.2肿瘤直径大于5cm、组织未分化、肿瘤侵袭胃壁全层的胃癌患者肿瘤组织中CD8+CD103+Trm细胞的数目,明显低于肿瘤直径小于5cm、组织分化、肿瘤侵袭胃壁深度浅的胃癌患者;有神经、脉管侵袭、区域淋巴结转移的患者肿瘤中CD8+CD103+Trm细胞数目明显低于无神经、脉管侵袭和区域淋巴结转移的患者。根据TNM分期分析,结果显示:随着胃癌病程的进展,胃癌患者肿瘤组织中CD8+CD103+Trm细胞数目逐步下降,其CD8+CD103+Trm细胞数目的下降与胃癌的进展程度成负相关。根据高倍镜下肿瘤组织中CD8+CD103+Trm细胞数目的中位数,将胃癌患者分为低CD8+CD103+Trm细胞数与高CD8+CD103+Trm细胞数两组,随访时间为60月。统计患者的生存率并进行Log-rank分析,结果显示高CD8+CD103+Trm细胞数组生存率显著高于低CD8+CD103+Trm细胞数组。2.CD8+CD103+Trm细胞在胃癌患者组织中的表型、功能特征2.1流式细胞术检测结果显示:与CD8+CD103-T细胞相比,在肿瘤浸润的 CD8+CD103+Trm 细胞中,CD45RA+CCR7+亚群及 CD45RA+CCR7-亚群所占的比例显著下降（1.0%vs.10.5%、2.0%vs.14.3%,P＜0.05）,而CD45RA-CCR7-亚群的比例则明显增加（94.1%vs.70.9%,P＜0.05）,但CD45RA-CCR7+亚群在 CD8+CD103-T 细胞与 CD8+CD103+Trm 细胞中的比例比较,差异无统计学意义（3.0%vs.4.3%,P＞0.05）。此外,与CD8+CD103-T细胞相比,CD8+CD103+Trm细胞表达更高水平的CD69、PD-1、CD39（73.5%vs.61.4%、79.3%vs.47.8%、23.3%vs 6.1%,P＜0.05）但是表达更低水平的KLRG1（12.2%vs.58.1%,P＜0.05）。2.2与CD8+CD103T细胞相比,胃癌组织中CD8+CD103+Trm细胞表达的颗粒酶B和穿孔素水平均显著下降（颗粒酶B:37.5%vs.47.9%,P＜0.05;穿孔素:4.0%vs.8.5%,P＜0.05）。并且用淋巴细胞刺激因子刺激之后胃癌组织中CD8+CD103+Trm细胞表达的颗粒酶B和穿孔素水平均显著下降（颗粒酶 B:36.1%vs.47.5%,P＜0.05;穿孔素:3.5%vs.7.8%,P＜0.05）。此外,与正常组织中的CD8+CD103+Trm细胞相比,胃癌组织中的CD8+CD103+Trm细胞表达更低水平的颗粒酶B和穿孔素（颗粒酶B:35.7%vs.41.0%,P＜0.05;穿孔素:2.7%vs.4.3%,P＜0.05）。3.胃癌组织中CD8+CD103+Trm细胞功能下降的机制3.1 ELISA结果显示:胃癌组织中的TGF-β1蛋白浓度与CD8+CD103+Trm细胞表达的颗粒酶B及穿孔素水平成负相关（P＜0.05）。3.2进一步体外利用重组人rhTGF-β1刺激培养显示:与未用rhTGF-β1刺激比,经rhTGF-β1刺激后CD8+CD103+Trm细胞表达的颗粒酶B及穿孔素水平均显著下降（P＜0.05）。结论:1.胃癌组织中CD8+CD103+Trm细胞的浸润水平与疾病的进展密切相关。2.与正常组织相比,胃癌组织中CD8+CD103+Trm细胞的频率下降,其抗肿瘤功能亦下降。3.通过TGF-β1刺激可诱导胃癌组织中CD8+CD103+Trm细胞下调表达颗粒酶B和穿孔素,降低其抗肿瘤功能。