双酚A是一种酚类雌激素,广泛用于水瓶、婴儿奶瓶、罐头瓶等食品和饮料容器。这些食品包装材料中微量的双酚A可以迁移到食品和周围环境中,通过食物链或生物链进入生物体内,对人和动物的健康造成威胁。本论文旨在建立酶联免疫吸附法,用于快速检测双酚A的残留。本研究以双酚A的结构类似物双酚酸为半抗原,采用碳二亚胺法将双酚酸分别偶联到KLH和OVA上,合成免疫抗原BVA-KLH和检测抗原BVA-OVA。紫外扫描光谱表明偶联成功。以BVA-KLH免疫BALB/c小鼠,采用PEG法将小鼠骨髓瘤细胞SP2/0与脾细胞进行融合,成功筛选到2株分泌抗双酚A抗体的杂交瘤细胞1G3和3H1。杂交瘤细胞3H1分泌的抗体为IgG1亚型,轻链为κ。建立了双酚A的ELISA检测方法,最低检测限(IC10)为0.43ng/mL,检测范围为lng/mL～50ng/mL, IC50为6.56ng/mL。特异性实验表明,与双酚S、双酚酸、对苯二酚和邻羟基苯甲酸的交叉反应率的交叉反应率均小于1%。对塑料瓶装的矿泉水和人血清进行添加回收实验,回收率分别为82.83%-101.94%和70.1%～87.8%,变异系数分别为2.94%～12.95%和4.79%～9.41%。采用间接竞争ELISA法测定儿童血清中双酚A含量,176份血清样品中,95份可检出双酚A,检出率为54%。全部样品的双酚A的浓度范围为未检出-26.48ng/mL。男童检出率高于女童,检出率差异在不同年龄组间不明显。综合各因素,本研究制备了特异性较高的双酚A单克隆抗体,建立的ELISA方法具有较高的灵敏度和特异性,可用于水样、人血清等样品的双酚A检测。