目的:观察CXCR4在膀胱癌细胞株EJ及其高侵袭力亚系EJ-M₃细胞中的表达情况并分析CXCR4的表达对细胞侵袭力的影响;构建靶向CXCR4的特异性siRNA真核表达载体,转染EJ-M₃细胞后观察CXCR4基因的表达情况并观察特异性siRNA对EJ-M₃细胞侵袭力的影响。方法:分别用细胞免疫荧光法和流式细胞术检测CXCR4蛋白在膀胱癌细胞株EJ及其高侵袭力亚系EJ-M₃细胞中的表达;构建和转染重组质粒pshRNA-CXCR4-1和pshRNA-CXCR4-2至EJ-M₃细胞株,通过细胞免疫荧光和半定量RT-PCR检测EJ-M₃中CXCR4蛋白的表达及其mRNA转录水平的变化;利用体外侵袭试验模型观察siRNA-CXCR4-1作用于CXCR4基因后EJ-M₃细胞侵袭力的变化,并且将RNA干扰试验中的细胞免疫荧光、RT-PCR的结果和侵袭试验的结果进行相关分析。结果:CXCR4在两株细胞中均有表达并且主要表达在细胞膜和细胞质中,EJ-M₃细胞阳性表达率（65.7%±10.35%）明显高于EJ细胞（25.4%±4.69%）,有显著性差异（P＜0.05）;成功的设计和构建重组质粒pshRNA-CXCR4-1和重组质粒pshRNA-CXCR4-2,转染EJ-M₃细胞后细胞免疫荧光检测到转染重组质粒pshRNA-CXCR4-1的实验组CXCR4荧光强度明显低于重组质粒pshRNA-CXCR4-2实验组以及空白对照组和阴性对照组,另外RT-PCR结果显示重组质粒pshRNA-CXCR4-1实验组CXCR4 mRNA的表达水平（0.153±0.02）明显低于重组质粒pshRNA-CXCR4-2实验组（0.46±0.03）,空白对照组（0.43±0.07）和阴性对照组（0.41±0.05）,有显著性差异,（P＜0.05）;体外侵袭实验中pshRNA-CXCR4-1实验组穿膜细胞数（39..67±8.45）明显少于空白对照组穿膜细胞数（135.33±9.28）及阴性对照组穿膜细胞数（123.63±6.36）,有显著性差异,（P＜0.05）;另外,EJ-M₃细胞株的体外侵袭能力与其CXCR4蛋白和CXCR4mRNA的表达水平呈正相关,（pCXCR4蛋白＜0.05,pmRNA＜0.05）,有显著性差异。结论:成功设计和构建的重组质粒pshRNA-CXCR4-1,将其转入膀胱癌细胞株EJ-M₃中可以明显的抑制细胞内CXCR4蛋白的表达及CXCR4 mRNA的转录,并能在体外侵袭试验中抑制EJ-M₃细胞的体外侵袭力;得出CXCR4是影响膀胱肿瘤细胞株体外侵袭力的重要因素,在介导膀胱肿瘤细胞的体外侵袭过程中起到重要的作用,为膀胱癌腔内种植转移机理的研究提供了新的理论依据,也为小RNA干扰技术防治膀胱肿瘤的种植转移奠定了试验基础。