【摘 要】
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肽核酸(Peptide Nucleic Acid,PNA)是一类人工核酸,其以中性的肽骨架代替了天然DNA中脱氧戊糖磷酸结构。得益于不带电荷的肽骨架,肽核酸可高效识别DNA和RNA,为基因治疗和生物检测提供了新的发展方向,成为了近年来的研究热点。但现有的肽核酸结构中不含有手性,导致其与DNA结合时缺乏指向性,无法与DNA形成专一的反平行结构,限制了其在临床和检测中的进一步应用。近年来国内外多个课题
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肽核酸(Peptide Nucleic Acid,PNA)是一类人工核酸,其以中性的肽骨架代替了天然DNA中脱氧戊糖磷酸结构。得益于不带电荷的肽骨架,肽核酸可高效识别DNA和RNA,为基因治疗和生物检测提供了新的发展方向,成为了近年来的研究热点。但现有的肽核酸结构中不含有手性,导致其与DNA结合时缺乏指向性,无法与DNA形成专一的反平行结构,限制了其在临床和检测中的进一步应用。近年来国内外多个课题组将不同种类的手性单元引入肽核酸结构中,开发出了多种手性肽核酸,但是新设计的手性肽核酸和DNA的手性匹配并未得到明显改善。为解决肽核酸与天然DNA和RNA手性匹配的问题,本论文提出将DNA中的脱氧戊糖环作为手性单元引入到肽核酸结构中,设计一种和天然DNA具有较好手性匹配的肽核酸分子,初步实现手性肽核酸与DNA或RNA等天然核酸的特异性结合。我们以商业化的脱氧核苷为起始原料,经过多步反应将其中的3’和5’羟基转化为构型保持氨基,再将其中5’氨基以9-芴基甲氧羰基选择性保护,3’氨基与丁二酸酐反应得到羧基,实现了全新结构的肽核酸单体的设计与合成。同时对该肽核酸单体的合成条件进行了详细的优化,初步建立了简单有效的制备方法。然后以此肽核酸单体为基础,对比了手性单链肽核酸的固相合成与液相合成的优劣,合成了T3序列的肽核酸序列。最后研究了该肽核酸序列与DNA形成双链和三链结构的可行性,证实了该手性肽核酸可嵌入DNA双链结构,形成较为稳定的三链DNA结构,为后续工作了提供了良好的理论基础。
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