灵芝的化学成分及保肝活性研究

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灵芝是担子菌纲、多孔菌科(Polyproraceae)灵芝属(Ganoderma)真菌灵芝(Ganoderma lucidum)和紫芝(G. japonicum)的总称,在中国有着悠久的药用历史。在本实验中,将干燥的灵芝粗粉采用70%甲醇浸泡提取,提取物浓缩,然后将浓缩物混悬于水中,依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇进行萃取。综合应用多种层析分离技术如硅胶柱层析,反相硅胶柱层析,Sephadex LH-20凝胶柱色谱等方法分别对石油醚萃取物,乙酸乙酯萃取物进行分离。其中对石油醚萃取物部分进行分离纯化得到了5个化合物,根据其理化性质及综合运用波谱数据鉴定其结构分别为:麦角甾-7,22-二烯-3β-醇(1),5a,8a-过氧-(22E,24R)-麦角甾-6,22-二烯-3β-醇(2),灵芝萜酮二醇(3),灵芝二元醇(4),酒酵母甾醇(5)。对乙酸乙酯萃取物部分进行分离纯化得到了8个化合物,根据其理化性质及综合运用波谱数据鉴定其结构分别为:甲基灵芝酸D(6),丹芝醇B(7),灵芝醇F(8),灵芝醇A(9),麦角甾-7,22-二烯-3β,5α,6β,9α-四醇(10),灵芝马酮(11),甲基灵芝酸B(12),赤芝酸LM1(13)。其中化合物3具有显著的肝保护活性。本实验采用蛋白质印迹法,探讨灵芝中13个单体化合物对Hep G2细胞中HO-1表达的作用。将灵芝中分离得到的单体化合物,通过Hep G2细胞模型检测蛋白质试验,结果显示,化合物3明显提高了HO-1在Hep G2细胞中的表达,说明对化合物3对肝脏具有一定的保护作用。本实验采用中药分离技术对灵芝进行提取分离,旨在分离得到具有活性的单体化合物,为灵芝的研究与应用奠定了基础。
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