目的选用更符合临床实际的卵巢储备功能下降(DOR)的自然模型,使用体外受精(IVF),蛋白质免疫印迹(Western Blot,WB)等技术,探索育麟方对卵泡发育的相关信号机制的影响,以起到对卵巢功能和卵子质量的保护作用,对受精率的提高作用,为推广育麟方临床应用和进一步研究解决DOR患者的生育问题奠定基础。方法选取7-8月龄SPF级健康老龄雌性C56BL/6小鼠,质量28.9±1.7g,作为DOR的自然模型,将其随机分为5组,即育麟方高剂量组、育麟方中剂量组、育麟方低剂量组、脱氢表雄酮(DHEA)组、老龄对照组,予不同剂量的育麟方,DHEA和等量蒸馏水灌胃治疗;选取6-8周龄SPF级健康性成熟雌性C56BL/6小鼠,质量17.7±1.0g,作为卵巢功能良好的青年对照组,予等量蒸馏水灌胃治疗。各组小鼠分别于38d,16时腹腔注射PMSG:10IU;于40d,16时腹腔注射HCG:10IU,并于41d处死;同日处死8周龄SPF级健康性成熟雄性昆明小鼠以获取精子,进行IVF。观察小鼠的一般情况,记录动情周期,放射免疫法测定小鼠血清AMH表达水平,光镜下观察卵子数目、形态和受精率,WB测定β-catenin和wnt4蛋白表达的变化。结果(1)与青年小鼠比较,老年小鼠的动情周期延长(P<0.01)和动情频次(P<0.05)下降(2)与青年对照组比较,育麟方高、中、低剂量组、DHEA组、老龄对照组血清AMH水平显著降低(P<0.05);与老龄对照组对照,育麟方高、中、低剂量组、DHEA组血清AMH水平显著增高(P<0.05);(3)与老龄对照组比较,育麟方高、中、低剂量组、DHEA组卵泡数及受精率显著增高(P<0.05);(4)与青年对照组比较,育麟方高、中、低剂量组、DHEA组、老龄对照组β-catenin表达水平显著降低(P<0.05);与老龄对照组比较,育麟方高、DHEA组β-catenin显著增高(P<0.05);(5)各组wnt4表达量无显著差异。结论(1)老龄小鼠存在动情周期延长或紊乱等卵巢储备功能下降的表现,可以作为DOR自然模型(2)育麟方能影响卵泡发育的信号机制,从而影响老龄小鼠颗粒细胞AMH、β-catenin的表达,调控卵泡发育,提高卵泡质量和数量,提高受精率。(3)育麟方不影响wnt4的表达,其作用位点可能在wnt4通路下游。