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背景据最新的肿瘤数据报道,肺癌仍是全世界死亡率最高的恶性肿瘤,5年生存率仅为18%。按照病理类型不同,肺癌主要分为小细胞肺癌、肺鳞癌、肺腺癌及其它不常见类型四大类,20世纪上叶,肺鳞癌最多,从20世纪70年代开始,肺腺癌的发病率迅速增加,据文献报道,目前肺腺癌约占肺癌总数的40%,已取代肺鳞癌成为最常见的病理类型。临床上针对肺腺癌的治疗包括外科手术治疗、静脉化疗、表皮生长因子受体-酪氨酸激酶抑制剂（epidermal growth factor receptor tyrosine kinase inhibitors,EGFR-TKIs）等靶向药物治疗。大多数肺腺癌的患者确诊时已为晚期,失去了手术机会,虽然晚期肺腺癌的标准治疗为含铂双药联合化疗,但是化疗疗效已进入平台期,EGFR突变患者接受EGFR-TKIs治疗约6-12个月后亦可产生耐药。肺癌不良的预后与其易发生浸润转移的生物学特性密切相关,且侵袭转移不仅是病情恶化的标志,还是治疗失败的重要原因。寻找新的治疗肺腺癌的方法成为亟待解决的问题之一。肺癌的发生和发展是一个多步骤、多基因参与的过程,其中上皮间质转化（epithelial—mesenchymal transition,EMT）是在上皮来源的恶性肿瘤侵袭和转移过程中起着重要作用。EMT是指上皮细胞在一定的生理及病理条件下向间充质细胞转分化的现象,在此过程中,上皮细胞逐渐丢失细胞极性和细胞间的粘附连接及紧密连接,获得更强的入侵和游走能力,与此同时伴随着细胞内各分子的表达变化,最显著的为以E-钙黏蛋白（E-cadherin）、连环蛋白（catenin）等表征上皮型指标蛋白的丧失以及波形蛋白（vimentin）和纤维粘连蛋白（fibronectin）等表征间质型指标蛋白的获得。转录因子是EMT发生的始动因素之一,同时其也受包括TGF-β、Notch、Hedgehog、wnt、STAT3等在内的多种信号通路的激活的影响,共同作用下促使肿瘤细胞发生转移、侵袭。关于转录因子,研究最多的是Snail、Twist和ZEB家族成员,近年来叉头框（Forkhead box,FOX）家族越来越受到人们重视。FOX是一类广泛存在的转录因子,之前对此家族研究发现FOX蛋白主要参与的是胚胎发育、细胞周期调控、组织特异性基因表达、免疫调节等多个生物学过程,后来研究发现其基因突变或表达异常与肿瘤的发生相关。近年来越来越多的研究证实,FOXCl在肿瘤的发生与进展中亦扮演着重要的角色。研究证实在恶性黑色素瘤、胃癌、肝癌、食管癌、胰腺癌等癌组织中FOXCl的表达明显高于癌旁组织,且表达水平越高预后越差。但FOXCl在肺腺癌中的表达研究尚不明确。高表达的FOXCl可诱导EMT,促进子宫内膜癌细胞、乳腺癌细胞及食管癌细胞的转移及侵袭。FOXCl是否可通过调节EMT的发生增强肺腺癌细胞的迁移侵袭能力从而影响患者的预后尚不得而知。因此,研究FOXCl在肺腺癌中迁移侵袭中的作用及其机制,可为临床治疗肺腺癌提供理论依据。目的通过检测肺腺癌A549细胞FOXCl沉默后EMT发生过程中相关分子E-cadherin、Vimentin表达水平及肿瘤细胞迁移侵袭能力变化,探讨FOXCl在肺腺癌迁移侵袭中的作用,为临床治疗肺腺癌提供理论依据。材料与方法1.人肺腺癌A549细胞购自中国科学院上海生命科学研究院细胞库。FOXC1小干扰RNA（siRNA-FOXC1）及阴性对照（Negative control,NC.siRNA）由上海吉玛制药技术有限公司合成。2.检测方法2.1将A549细胞的于含10%胎牛血清的RPMI1640培养液中培养,培养瓶放置于37℃,含5%CO2培养箱中,常规换液、消化、传代。分别将siRNA-FOXC1、NC.siRNA-FOXC1转染至A549细胞,记为实验组,阴性对照组组,不做任何处理的为空白对照组。2.2采用RT-qPCR实验方法检测三组细胞FOXC1、E-Cadhenrin、Vimentin mRNA相对表达水平,Western blot方法检测三组细胞FOXC1、E-Cadhenrin、Vimentin蛋白相对表达水平,内参基因为Gapdh。2.3划痕实验检测三组细胞的迁移能力。2.4 Transwell侵袭实验测定三组细胞的侵袭能力。统计学分析采用SPSS 21.0对实验数据进行统计分析,描述计量资料采用x±s,采用单因素方差分析对多组定量资料的进行比较,取α=0.05为检验水准。对符合正态分布、方差齐的资料组间两两比较采用LSD-t检验,否则采用Kruskal-Wallis检验,均取α=0.05为检验水准。结果1.实验组中A549细胞FOXC1 mRNA及蛋白表达水平均较空白对照组及阴性对照组均明显降低（Ρ均<0.001）,阴性对照组组与空白对照组相比较,表达差异均无统计学意义,Ρ>0.05。2.实验组中A549细胞E-cadherin mRNA及蛋白相对表达水平均明显高于空白对照组及阴性对照组（Ρ均<0.001）,阴性对照组与空白对照组相比较,表达差异无统计学意义,Ρ>0.05;实验组中Vimentin mRNA及蛋白表达水平均明显低于空白组及阴性对照组（Ρ均<0.001）,阴性对照组与空白对照组相比较,表达差异无统计学意义,Ρ>0.05。3.划痕试验显示实验组A549细胞迁移率显著低于阴性对照组与空白对照组（Ρ均<0.001）,阴性对照组与空白对照组相比,细胞迁移率差异无统计学意义,Ρ>0.05。4.Transwell侵袭试验结果显示实验组A549细胞侵袭数量显著低于阴性对照组与空白对照组（Ρ均<0.001）,阴性对照组与空白对照组相比较,细胞侵袭数量差异无统计学意义,Ρ>0.05。结论沉默FOXC1抑制了肺腺癌A549细胞上皮间质转化的发生,减弱了肺腺癌A549细胞的迁移侵袭能力,可为临床治疗肺腺癌提供理论依据。