废烟叶源茄尼醇的制备及其生物转化产辅酶Q10的研究

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辅酶Q10(Coenzyme Q10,简写为CoQ10),又称泛醌,本质上是一种类维生素类物质,脂溶性苯的衍生物。其在自然界中分布广泛,主要存在于酵母、植物叶子和种子及动物的心脏、肝脏和肾脏中。辅酶Q10是细胞呼吸链上的一种递氢体,是细胞自身产生的天然抗氧化剂、细胞代谢激活剂。本论文对茄尼醇的提取工艺、产辅酶Q10菌株的筛选鉴定及其发酵条件,以及茄尼醇生物转化生产辅酶Q10进行了研究。茄尼醇是辅酶Q10的重要侧链中间体。本文以废次烟叶为原料,从粗品提取、皂化和结晶三个主要步骤研究了茄尼醇的提取纯化工艺,结果表明采用搅拌法提取粗品,用氢氧化钾溶液在60℃皂化3小时,用乙醇作为极性溶剂进行低温结晶能达到最佳效果,一次结晶可得到63.85%的茄尼醇精品。本文进行了高产辅酶Q10菌的筛选和菌种鉴定。从钱塘江沿岸九堡段土壤中获得一株能稳定高产辅酶Q10的E03菌,并进行了一系列的形态学和生理生化实验鉴定,以及Biolog的系统分析和16SrDNA同源性的鉴定,初步确定E03菌株为鞘氨醇单胞菌属(Sphingomonas)细菌,与少动鞘氨醇单孢菌(Sphingomonas paucimobilis)具有98%的相似性,命名为Sphingomonas sp. ZJUTE03。考察了培养基组分和生长条件对Sphingomonas sp. ZJUTE03产辅酶Q10的影响,结果显示,以15 g/L葡萄糖为碳源,以10 g/L(NH42SO4作为氮源,初始pH为8.0,培养温度为25℃时,产量最高,达到了36.09mg/L。茄尼醇的添加对辅酶Q10产量有显著的促进作用,本文以无水乙醇为溶解体系,于发酵培养基中摇床培养12hr后,加入茄尼醇粗品,终浓度为0.75g/L,继续发酵培养12hr,进行前体转化反应。实验结果能达到最高产值96.88 mg/L。
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