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目的：慢性荨麻疹（Chronic urticaria，CU）是一种多数病因不明、病程长且治疗困难的皮肤病。虽然不威胁生命，但由于其具有反复发作性，所带来的痛苦和烦恼及对工作和社会生活的影响甚至不亚于心脏疾患。目前关于慢性荨麻疹伴发肿瘤的报道日渐增多，主要包括卵巢肿瘤、颅内肿瘤、甲状腺癌、肺癌、结肠癌等。绝大多数荨麻疹在肿瘤切除后不再复发，表明慢性荨麻疹发病可能与肿瘤相关。根据美国皮肤病文献最新报道，慢性荨麻疹患者发生恶性肿瘤的风险比较大，以非霍奇金淋巴瘤最多。虽然还不清楚慢性荨麻疹与恶性肿瘤的共存是一种偶然，抑或是它们共享某种发病机制，但这提醒我们对慢性荨麻疹的研究不容忽视。关于慢性荨麻疹的治疗，除了H1受体拮抗剂、H2受体拮抗剂、抗组胺药物、糖皮质激素外，免疫治疗已成为目前研究热点。正常机体内Th1/Th2网络维持着动态平衡。有研究表明慢性荨麻疹患者Th1/Th2平衡失调。许多学者认为辅助性T细胞（Helper T cell，Th细胞）在慢性荨麻疹发病过程中占重要地位。卡介菌多糖核酸（PolysaccharideNucleic Acid Fraction of Bacillus Calmette Guerin，BCG-PSN）是从卡介菌中提取的一种具有免疫调节功能的物质，有临床报道卡介菌多糖核酸治疗慢性荨麻疹疗效显著，其机制可能与调节机体免疫相关。本实验在体外从细胞水平研究不同浓度卡介菌多糖核酸对慢性荨麻疹患者外周血淋巴细胞分泌Th1和Th2类细胞因子的影响，以探讨卡介菌多糖核酸治疗慢性荨麻疹的机制，为临床上应用卡介菌多糖核酸治疗慢性荨麻疹提供依据。方法：1.细胞来源：本实验采用的患者外周血淋巴细胞均来自于2012年2月～2012年7月承德医学院附属医院皮肤科住院和门诊就诊患者，均经临床诊断确诊为慢性特发性荨麻疹。对照组外周血淋巴细胞均来自于承德医学院附属医院无过敏史的健康志愿者。2.实验分组及干预：依据培养慢性荨麻疹患者外周血淋巴细胞的RPMI-1640完全培养基中所含卡介菌多糖核酸浓度的不同进行分组，设0μl/ml，5μl/ml，10μl/ml，20μl/ml，40μl/ml，80μl/ml六个实验组，健康人外周血淋巴细胞为对照组，各组均含有相同浓度的植物血凝素（Phytohmplutintin，PHA）100μg/ml。3.采用免疫细胞化学染色方法检测各组细胞IFN-γ、IL-2、IL-4和IL-10蛋白的表达情况。4.采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测各组细胞培养上清中IFN-γ、IL-2、IL-4和IL-10的含量。5.数据统计分析：应用SPSS17.0统计学软件，对结果进行单因素方差分析，两变量之间的相关性分析采用Pearson相关分析，p<0.05表示差异有统计学意义。结果：1.慢性荨麻疹患者外周血淋巴细胞IFN-γ、IL-2、IL-4和IL-10的表达：免疫细胞化学法检测慢性荨麻疹患者外周血淋巴细胞IFN-γ、IL-2阳性细胞数百分比（%）分别为9.786±1.926、12.023±2.381，与健康对照组的30.472±5.247、32.148±3.370相比，均明显降低，IL-4、IL-10阳性细胞数百分比（%）分别为17.891±3.361、17.922±2.916，与健康对照组的10.331±2.632、10.781±2.477相比，均明显升高，经方差分析各组差异均有统计学意义（p<0.05）。采用ELISA检测慢性荨麻疹患者外周血淋巴细胞培养上清中IFN-γ、IL-2的含量（pg/ml）分别为205.107±92.424、244.838±54.780，与健康对照组的428.837±138.009、340.203±60.769相比，均明显降低，IL-4、IL-10的含量（pg/ml）分别为29.764±11.219、70.556±24.714，与健康对照组的11.850±4.331、32.588±17.321相比，均明显升高，经方差分析各组差异均有统计学意义（p<0.05）。2.卡介菌多糖核酸对慢性荨麻疹患者外周血淋巴细胞分泌IFN-γ的影响：在不同浓度卡介菌多糖核酸（0μl/ml，5μl/ml，10μl/ml，20μl/ml，40μl/ml，80μl/ml）作用下，各组经PHA诱导的淋巴细胞连续培养96h，免疫细胞化学染色可见随卡介菌多糖核酸浓度的不断增高，慢性荨麻疹患者淋巴细胞IFN-γ阳性细胞数百分比越来越高，逐渐接近健康对照组，且呈现一定的剂量依赖关系（r=0.804，p<0.01）。经方差分析，差异有显著性（F=150.137，p<0.01）。两两比较除10μl/ml组与20μl/ml组之间比较差异无显著性外，其余各组之间差异均有显著性。ELISA法检测各组上清液中IFN-γ的含量，可见随着卡介菌多糖核酸浓度的不断增高，慢性荨麻疹患者淋巴细胞表达IFN-γ的量越来越高，逐渐接近健康对照组，且呈现一定的剂量依赖关系（r=0.450，p<0.01），经方差分析，差异有显著性（F=15.790，p<0.01）。两两比较除0μl/ml组与5μl/ml组，10μl/ml组与20μl/ml组，20μl/ml组与40μl/ml组，20μl/ml组与80μl/ml组，20μl/ml组与健康对照组，40μl/ml组与80μl/ml组，40μl/ml组与健康对照组，80μl/ml组与健康对照组之间比较差异无显著性外，其余各组之间差异均有显著性（p<0.05）。3.卡介菌多糖核酸对慢性荨麻疹患者外周血淋巴细胞分泌IL-2的影响：在不同浓度卡介菌多糖核酸（0μl/ml，5μl/ml，10μl/ml，20μl/ml，40μl/ml，80μl/ml）作用下，各组经PHA诱导的淋巴细胞连续培养96h，免疫细胞化学染色可见，随卡介菌多糖核酸浓度的不断增高，慢性荨麻疹患者淋巴细胞IL-2阳性细胞数百分比越来越高，逐渐接近健康对照组，且呈现一定的剂量依赖关系（r=0.735，p<0.01）。经方差分析，差异有显著性（F=88.730，p<0.01）。两两比较除5μl/ml组与10μl/ml组，40μl/ml组与80μl/ml组之间比较差异无显著性外，其余各组之间差异均有显著性（p<0.05）。ELISA法检测各组上清液中IL-2的含量可见，随着卡介菌多糖核酸浓度的不断增高，慢性荨麻疹患者淋巴细胞表达IL-2的量越来越高，逐渐接近健康对照组，且呈现一定的剂量依赖关系（r=0.428，p<0.01），经方差分析，差异有显著性（F=10.258，p<0.01）。两两比较除0μl/ml组与5μl/ml组，5μl/ml组与10μl/ml组，10μl/ml组与20μl/ml组，20μl/ml组与40μl/ml组，20μl/ml组与健康对照组，40μl/ml组与80μl/ml组，40μl/ml组与健康对照组，80μl/ml组与健康对照组之间比较差异无显著性外，其余各组之间差异均有显著性（p<0.05）。4.卡介菌多糖核酸对慢性荨麻疹患者外周血淋巴细胞分泌IL-4的影响：在不同浓度卡介菌多糖核酸（0μl/ml，5μl/ml，10μl/ml，20μl/ml，40μl/ml，80μl/ml）作用下，各组经PHA诱导的淋巴细胞连续培养96h，免疫细胞化学染色可见，随卡介菌多糖核酸浓度的不断增高，慢性荨麻疹患者淋巴细胞IL-4阳性细胞数百分比越来越低，逐渐接近健康对照组，且呈现一定的剂量依赖关系（r=-0.624，p<0.01）。经方差分析，差异有显著性（F=45.744，p<0.01）。两两比较除20μl/ml组与40μl/ml组，40μl/ml组与80μl/ml组，40μl/ml组与健康对照组，80μl/ml组与健康对照组之间比较差异无显著性外，其余各组之间差异均有显著性（p<0.05）。ELISA法检测各组上清液中IL-4的含量，可见随着卡介菌多糖核酸浓度的不断增高，慢性荨麻疹患者淋巴细胞表达IL-4的量越来越低，逐渐接近健康对照组，且呈现一定的剂量依赖关系（r=-0.415，p<0.01）。经方差分析，差异有显著性（F=16.731，p<0.01）。两两比较除5μl/ml组与10μl/ml组，10μl/ml组与20μl/ml组，20μl/ml组与40μl/ml组、20μl/ml组与80μl/ml组，40μl/ml组与80μl/ml组，80μl/ml组与健康对照组之间比较差异无显著性外，其余各组之间差异均有显著性（p<0.05）。5.卡介菌多糖核酸对慢性荨麻疹患者外周血淋巴细胞分泌IL-10的影响：在不同浓度卡介菌多糖核酸（0μl/ml，5μl/ml，10μl/ml，20μl/ml，40μl/ml，80μl/ml）作用下，各组经PHA诱导的淋巴细胞连续培养96h，免疫细胞化学染色法检测可见，随卡介菌多糖核酸浓度的不断增高，慢性荨麻疹患者淋巴细胞IL-10阳性细胞数百分比越来越低，逐渐接近健康对照组，且呈现一定的剂量依赖关系（r=-0.472，p<0.01）。经方差分析，差异有显著性（F=24.522，p<0.01）。两两比较除0μl/ml组与5μl/ml组，5μl/ml组与10μl/ml组，20μl/ml组与40μl/ml组，20μl/ml组与80μl/ml组，40μl/ml组与80μl/ml组之间比较差异无显著性外,其余各组之间差异均有显著性（p<0.05）。ELISA法检测各组上清液中IL-10的含量可见，随着卡介菌多糖核酸浓度的不断增高，慢性荨麻疹患者淋巴细胞表达IL-10的量越来越低，逐渐接近健康对照组，且呈现一定的剂量依赖关系（r=-0.278，p<0.01）。经方差分析，差异有显著性（F=7.720，p<0.01）。两两比较除0μl/ml组与5μl/ml组，5μl/ml组与10μl/ml组，5μl/ml组与20μl/ml组，10μl/ml组与20μl/ml组，10μl/ml组与40μl/ml组、10μl/ml组与80μl/ml组，20μl/ml组与40μl/ml组，20μl/ml组与80μl/ml组，40μl/ml组与80μl/ml组，80μl/ml组与健康对照组之间比较差异无显著性外，其余各组之间差异均有显著性（p<0.05）。结论：1.与健康人群相比慢性荨麻疹患者外周血淋巴细胞分泌IFN-γ和IL-2减少，分泌IL-4和IL-10增多，存在着Th细胞亚群分化失衡，以Th2优势表达。2.卡介菌多糖核酸可促进慢性荨麻疹患者外周血淋巴细胞分泌IFN-γ和IL-2，抑制外周血淋巴细胞分泌IL-4和IL-10，从而调节外周血淋巴细胞Th1、Th2分化。