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目的:1.通过积雪草苷（As）预处理大鼠急性缺血再灌注损伤（IRI）模型,明确积雪草苷对大鼠肾IRI诱发的炎症反应的影响。2.观察As对肾IRI大鼠SIRT1、NF-κB、NLRP3蛋白表达的影响,进一步阐明积雪草苷通过激活SIRT1/NF-κB/NLRP3信号通路减轻肾IRI所诱发的炎症反应。方法:1.实验分组:将40只大鼠分为假手术组（Sham组）和缺血再灌注组（IRI组）,而IRI组则根据处理方法不同分为:肾缺血再灌注损伤模型组（Model组）、积雪草苷预处理组（As组）、积雪草苷预处理+SIRT1抑制剂组（As+EX-527组）、SIRT1抑制剂组（EX-527组）,共5组,每组8只。2.分组处理:实验选取健康SPF级雄性SD大鼠40只,适应性饲养1周后,采用随机数字表法将40只大鼠分为5组（n=8）:（1）Sham组:予以等量蒸馏水（10mL/kg/d）连续灌胃处理4周,造模时仅游离双肾及肾蒂后关闭腹腔。（2）Model组:予以等量蒸馏水（10mL/kg/d）连续灌胃处理4周,造模同时夹闭双肾肾蒂45min;（3）As组:予以等量积雪草苷水溶液（80mg/kg/d）连续灌胃处理4周,余同Model组;（4）As+EX-527组:造模前予以等量SIRT1抑制剂EX-527（5mg/kg/d）腹腔注射3天,术中再灌注前30 min腹腔注射1次,余同As组;（5）EX-527组:予以等量蒸馏水（10mL/kg/d）连续灌胃处理4周,EX-527用法同上。在Sham组关闭腹腔24 h和IRI组再灌注24 h后,称重麻醉后下腔静脉采血,取两侧肾脏组织并称重。3.指标检测:取各组大鼠两侧肾脏组织称重计算肾系数;分别采用肌氨酸氧化酶法、脲酶法测定Scr、BUN水平,双抗夹心法测定肾脏损伤因子（KIM-1）、细胞因子（TNF-α、IL-1β、IL-10、IL-6）、趋化因子（MCP-1）和黏附因子（ICAM-1）水平;苏木素-伊红（HE）染色观察肾脏组织病理学改变及肾小管坏死评分比较;蛋白免疫印迹法（Western Blot）测定肾脏组织中SIRT1/NLRP3/NF-κB通路相关蛋白相对表达量;免疫组化（IHC）观察肾脏组织中NLRP3炎症小体的表达及定位情况。结果:1.肾系数:与Sham组大鼠相比,IRI组肾系数明显升高（P＜0.05）;As组与Model组相比,肾系数有所降低（P＜0.05）;As组与As+EX-527组相比,无显著差异（P＞0.05）。2.肾功能相关指标及KIM-1情况:与Sham组相比,IRI组大鼠肾功能相关指标（Scr、BUN）、KIM-1的含量显著增高（P＜0.05）;且As可改善IRI造成的肾脏损伤（P＜0.05）;而与As组比较,As+EX-527组结果显示As的肾脏保护作用可被EX-527所抑制（P＜0.05）。3.HE染色:Sham组肾组织结构大体正常,未见炎症细胞浸润。与Sham组比较,Model组肾组织结构重度异常,视野内部分肾小管上皮细胞变性、水肿,胞质呈空泡,管腔明显扩张;局部间质可见少量炎症细胞浸润;肾小球结构相对完整。与Model组比较,As组肾组织损伤有所减轻,视野内部分肾小管轻度扩张;部分肾小管上皮细胞轻度水肿,胞质淡染;局部间质可见个别炎症细胞浸润;部分视野可见肾小球萎缩。与As组比较,As+EX-527组肾组织结构重度异常,大部分肾小管上皮细胞水肿、变性,胞质呈空泡化,管腔扩张;间质可见炎症细胞弥散性浸润;肾小球结构较完整。而EX-527组肾组织结构重度异常,视野内部分肾小管上皮细胞变性,管腔扩张明显;部分肾小管上皮细胞轻度水肿,胞质淡染;间质可见大量炎症细胞弥散性浸润。4.肾小管坏死半定量评分:与Sham组相比,Model组肾小管损伤评分明显增高（P＜0.05）;与Model组比较,As组肾小管坏死评分显著降低（P＜0.05）;与As组比较,As+EX-527组肾小管坏死评分升高（P＜0.05）。5.炎症相关指标:与Sham组相比,IRI明显增加了细胞因子（TNF-α、IL-1β和IL-6）、髓过氧化物酶（MPO）、趋化因子（MCP-1）和黏附因子（ICAM-1）的水平,降低了抑炎因子（IL-10）的水平（P＜0.05）,且As可抑制这种促炎作用（P＜0.05）;而与As组比较,As+EX-527组结果显示As上述作用可以被EX-527所抑制（P＜0.05）。6.肾组织通路相关蛋白表达:与Sham组相比,肾脏IRI明显降低SIRT1的表达,增加NF-κB和NLRP3的表达（P＜0.05）;且这种作用可以被As所逆转（P＜0.05）;而与As组比较,As+EX-527组结果显示As的促进SIRT1表达,抑制NF-κB、NLRP3表达的作用可以被EX-527所抑制（P＜0.05）。7.NLRP3免疫组化表达及定位情况:镜下可见Sham组肾小球区域未见明显阳性表达,肾小管可见弱阳性表达;Model组、As+EX-527组均可见肾小管强阳性表达,EX-527组系膜细胞及肾小管上皮细胞呈强阳性表达;结果显示:与Sham相比,平均光密度值（累积光密度值/区域面积）IRI明显增加NLRP3的表达（P＜0.05）;且As可抑制这种促进NLRP3表达作用（P＜0.05）;而与As组比较,As+EX-527组结果显示As上述作用可被EX-527所抑制（P＜0.05）。结论1.通过积雪草苷预处理大鼠肾IRI模型,证实了积雪草苷可通过抑制肾IRI的炎症反应而发挥保护作用,主要表现为细胞因子（TNF-α、IL-6和IL-1β）、黏附因子（ICAM-1）和趋化因子（MCP-1）水平的降低和抗炎因子（IL-10）的升高。2.积雪草苷可增加肾IRI大鼠SIRT1蛋白的表达,抑制NF-κB/NLRP3相关蛋白的表达,且SIRT1抑制剂EX-527可以抑制这种作用;表明积雪草苷通过调控SIRT1/NF-κB/NLRP3相关信号通路而减轻大鼠IRI诱发的炎症反应发挥肾脏保护作用。