活体内研究细胞趋化因子CCL18、CXCL1和IL8在人卵巢癌生长转移中作用

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目的晚期卵巢上皮性癌患者发生盆腔外腹膜广泛浸润转移,难以通过手术清除病灶是患者死亡的主要原因。因此,研究卵巢癌转移相关的因素,进而采取行之有效的阻断治疗措施,已成为提高疗效的关键。本研究基于前期发现在患者血清上调表达的趋化因子CCL18、CXCL1和工L8能明显促进体外培养的EOC细胞生长或侵袭,通过动物体内模型研究CXCL1、CCL18、IL-8三种趋化因子在卵巢癌生长转移中的作用。方法利用PWPI慢病毒真核细胞表达系统,构建携带GFP荧光标记并过度表达趋化因子CCL18、CXCL1和IL8的三个剪切亚型(工L8-1,IL8-2,IL8-3)的卵巢癌细胞系。以此细胞系建立卵巢癌裸鼠皮下移植瘤和原位移植瘤模型,观察CXCL1、CCL18、IL8趋化因子对肿瘤生长及转移的影响。qRT-PCR检测移植瘤中MMP家族和VEGF家族基因的表达情况。Western blot和免疫组化检测移植瘤中CXCL1、CCL18、IL8蛋白表达。结果qRT-PCR结果显示感染重组慢病毒的SKOV3细胞CXCL1、CCL18和IL8基因表达显著高于对照组(P<0.05);Western blot和免疫组化结果表明CXCL1、CCL18、IL8蛋白在SKOV3细胞中高表达,而对照几乎不表达目的蛋白。IL8-1、SKOV3、IL8-2/SKOV3、CXCL1/SKOV3细胞皮下移植瘤重量明显高于对照(P<0.05);CCL18/SKOV3组和IL8-3/SKOV3组与对照相比无差异显著性。原位移植瘤模型结果显示,IL8-1/SKOV3、IL8-2/SKOV3和CCL18/SKOV3在卵巢原位成瘤两周可观察到向肠和脾脏转移,在腹腔内转移速度明显快于CXCL1/SKOV3和对照;qRT-PCR检测结果显示:IL8-2/SKOV3与对照组相比较,VEGFC、MMP1、MMP7、MMP11、MMP12、MMP15mRNA相对表达量均显著增高(P<0.05)。CCL18/SKOV3组与对照组相比较,VEGFC、MMP1、 MMP7、MMP11、MMP15mRNA相对表达量均显著增高(P<0.05)。结论体内移植瘤模型证实趋化因子CCL18与卵巢癌的转移相关,而CXCL1主要促进肿瘤细胞生长,但不能促进肿瘤细胞转移。IL8同时能促进肿瘤生长和转移。
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