低色素出芽短梗霉的选育及其培养条件优化

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短梗霉多糖是一种由出芽短梗霉发酵生成的胞外多糖。本文主要研究了低色素出芽短梗霉的选育、培养条件的优化、发酵罐验证实验和产品的分离提纯等。首先通过紫外线、硫酸二乙酯(DES)诱变,获得一株低色素出芽短梗霉变异株G-58,发酵液颜色白色,吸光度0.300,最终pH值稳定在3.4-3.5,多糖产量19.2g/L以上;发酵性能稳定。由单因素实验和正交实验所得各种数据及推论,可以总结出以下结论:当蔗糖50g/L,MgSO40.4 g/L,(NH4)2SO4 0.4g/L,酵母膏0.3g/L,NaCl 4g/L, K2HPO4 6g/L时,选用36h接种龄,2%(v/v)接种量,在28℃条件下发酵出芽短梗霉,短梗霉多糖产量达到23g/L,发酵液的吸光度0.04。然后进行发酵罐验证实验,得到如下结论:结果基本与前面结论一致,以搅拌速度与通气量的不同组合发酵,搅拌速度400r/min、通气量3 L/min是最佳组合,多糖产量达到24.1 g/L糖转化率达48.2%。最后由以上发酵过程研究和多糖分离提纯单因素及正交实验的各种数据,可总结出以下结论:在最佳发酵条件的基础上,将120h短梗霉多糖发酵液加蒸馏水稀释5倍,以4000r/min的速度离心30min分离菌体,将上清液pH值调为7.0,经70℃热处理(灭酶)10min后冷却至室温,加3倍体积的95%乙醇,搅拌,4℃放置12h,使短梗霉多糖充分沉淀,再以4500r/min的速度离心15min分离多糖沉淀,粗多糖用65%酒精洗涤3次后过滤或离心,经60℃热风干燥得到纯品。短梗霉多糖产量约为20g/L;提纯得率为89.2%,最终产品纯度为95.2%,多糖呈雪白色、易溶于水,与标准品类似。
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