多囊卵巢综合征(polycystic ovarian syndrome,PCOS)是内分泌和代谢功能紊乱性疾病,是无排卵型不孕症的最主要原因,目前针对PCOS患者,经内分泌和代谢紊乱纠正后可恢复正常排卵,但却存在妊娠率低,流产率高的现象,是目前国内外生殖内分泌研究的热点和难点之一,多数学者认为可能与患者体内长期激素失调引起的子宫内膜对胚胎的容受性降低有关。胚胎着床和生长发育需要子宫内膜和胚胎同步发育,一般认为子宫内膜允许胚胎着床的短暂时期是排卵后的7-8天(即月经周期的第21-22天),这一时期被称为种植“窗口期”。研究认为胚胎着床存在粘附、侵入、胎盘形成三个阶段,任何一个环节出现差错将导致胚胎无法顺利着床,引起不良妊娠结局。既往研究认为：整合素主要作用于胚泡与子宫内膜的粘附过程；基质金属蛋白酶可降解子宫内膜细胞外基质从而使胚泡侵入着床点的子宫内膜；白血病抑制因子在着床期子宫内膜中特异性表达。以上均被认为是子宫内膜容受性的标志物。但是,目前尚无公认的确切的子宫内膜容受性的标志物。血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)是1989年Ferrara等从牛脑垂体滤泡星形细胞的体外培养液中分离纯化到的一种蛋白质,在人和动物的肝、脑、肾、肺、脾和垂体、骨骼、卵巢等组织中广泛分布,属于肝素结合蛋白家族。VEGF与其受体结合后,诱导血管内皮细胞的分裂、增殖,促使内皮细胞迁移,增强毛细血管通透性,使血浆外渗,有利于大量新生血管以出芽的方式形成；其又可使非内皮细胞分泌VEGF,再通过旁分泌的机制作用于其它细胞。VEGF在整个月经周期子宫内膜均有表达,且呈周期依赖性改变,着床窗口期VEGF可能通过增加胚泡植入部位血管的通透性和子宫内膜的容受性来影响植入,与胎盘血管的形成关系密切。一方面,VEGF又称为血管通透性因子,其使在植入前期就开始扩张的子宫内膜血管系统在植入后扩张更加显著,血管通透性增强,为植入做好准备。巨噬细胞移动抑制因子(macrophage migration inhibitory factor, MIF)是集细胞因子、酶、神经内分泌激素特性于一身的多效能蛋白分子,广泛参与炎症、肿瘤形成、细胞增殖和免疫应答等过程。研究认为在正常人子宫内膜组织中,MIF在子宫内膜的表达呈周期依赖性,可上调整合素和VEGF在子宫内膜的表达,也可能与其他细胞因子间存在相互调节的关系,从而影响子宫内膜容受性,在胚胎植入中可能起着积极的作用。MIF、VEGF的表达与子宫内膜容受性有密切的关系,本课题将应用免疫组化的方法测定PCOS患者窗口期子宫内膜MIF、VEGF的表达,并分析两者之间的相关性,探讨MIF、VEGF的表达与PCOS患者内分泌紊乱纠正后仍出现低妊娠率高流产率的可能作用机制。目的1研究PCOS组及对照组着床窗口期子宫内膜组织中VEGF、MIF的表达。探讨VEGF、MIF与PCOS患者内分泌紊乱纠正后子宫内膜容受性的相关性。2探讨VEGF、MIF与PCOS患者内分泌紊乱纠正后妊娠率低、流产率高的可能作用机制。材料与方法1研究对象及分组PCOS组：10例为2009年11月至2010年6月在郑州大学第三附属医院妇科门诊就诊的已婚PCOS患者,年龄25～35岁,平均年龄(27.80±1.87)岁。纳入标准：PCOS诊断符合2003年鹿特丹修正的诊断标准：①稀发排卵或无排卵；②高雄激素的临床表现和(或)高雄激素血症；③超声表现为多囊卵巢[一侧或双侧卵巢有12个以上直径2-9mm的卵泡和(或)卵巢体积>10ml]；上述3条中符合2条,并排除其他疾病,如库欣综合征、先天性肾上腺皮质增生症、分泌雄激素的肿瘤等。经治疗3-9个月后,基础内分泌测定正常,月经规则,自然周期排卵或使用促排卵治疗后可正常排卵；阴道B超未发现子宫及卵巢有器质性病变存在,不合并子宫内膜异位症；丈夫精液检查正常。对照组：11例为同期因男方因素或输卵管因素就诊的不孕症患者,年龄25-35岁,平均年龄(29.0±2.79)岁。纳入标准：月经规律,排卵正常；基础内分泌测定正常；阴道B超未发现子宫及卵巢有器质性病变存在,不合并子宫内膜异位症；近3个月未用过激素类药物。PCOS组与对照组标本的收集均得到患者的知情同意。2标本收集和实验方法PCOS组与对照组均于排卵后7-8天取空腹静脉血,测定血清人绒毛膜促性腺激素(human chorionic gonadotropin, HCG)浓度,HCG<30 IU/L认为本次无妊娠可能。取静脉血确认HCG<30 IU/L当日用一次性子宫内膜吸管进行子宫内膜取材,所取新鲜内膜组织用10%甲醛固定6-24h后,常规脱水,石蜡包埋,每个标本作4mm连续切片。切片后至60℃烤箱2h,常规HE染色,观察所取子宫内膜的组织学形态。载玻片涂防脱片剂多聚赖氨酸,经过脱蜡、水化、微波抗原修复等,采用免疫组化法进行定性及半定量测定子宫内膜组织中MIF、VEGF的表达情况。3统计学分析采用SPSS17.0统计分析软件,数据分析采用t检验和pearson相关性分析,分类变量资料样本率的比较采用Fisher’s确切概率法,P<0.05为有显著性差异。结果1研究对象一般情况比较：PCOS组和对照组相比,年龄差异无统计学意义(P>0.01)。2 PCOS组及对照组子宫内膜病理结果比较：PCOS组分泌期子宫内膜中,分泌反应欠佳发生率高于对照组,差异有统计学意义(P<0.01),3 VEGF在两组子宫内膜组织中的表达：VEGF主要表达在子宫内膜腺上皮细胞、间质细胞和血管内皮细胞的胞浆中,以腺上皮细胞中表达明显,PCOS组子宫内膜VEGF较对照组低表达,差异有统计学意义(P<0.05)。4 MIF在两组子宫内膜组织中的表达：MIF主要表达在子宫内膜腺上皮细胞和间质细胞的胞浆内,PCOS组子宫内膜MIF较对照组低表达,差异有统计学意义(P<0.05)。5 MIF和VEGF在PCOS组子宫内膜的表达呈正相关性(相关系数为0.686,P<0.05)。结论1 PCOS组着床窗口期子宫内膜组织中MIF、VEGF的低表达,可能影响PCOS患者子宫内膜容受性。2 PCOS组子宫内膜组织中MIF与VEGF的表达呈正相关：提示二者可能协同作用导致PCOS患者内分泌紊乱纠正后仍出现妊娠率低、流产率高现象的原因之一。