目的:侵袭性念珠菌病(invasive candidiasis,IC)是一种临床症状和体征不典型,且发病率和病死率逐年增高的感染性疾病。早期的诊断和治疗有助于提高患者生存率并改善患者预后。本研究拟构建核酸序列依赖扩增(nucleic acid sequence-based amplification,NASBA)技术检测念珠菌,用于快速诊断IC,并结合G试验和血培养结果,确定实验室诊断IC的最佳方案。方法:首先确定针对念珠菌属18S rRNA的高度保守序列的引物,建立NASBA结合电泳检测白色念珠菌标准株(ATCC14053)的方法,并对其灵敏度和特异性进行评估。然后,参照EORTC/MSG对侵袭性真菌病定义的标准,拟定IC阳性病例组和排除IC的阴性对照组的纳入标准,收集并最终纳入统计38例临床样本(病例组18例(确诊15例,拟诊3例),对照组20例),应用本研究构建的NASBA法进行检测,收集所有病例的血培养和G试验检查结果,并计算三种方法的诊断性能参数。结果:NASBA产物电泳结果显示临床七种不同的念珠菌(白色念珠菌、热带念珠菌、近平滑念珠菌、光滑念珠菌、克柔念珠菌、都柏林念珠菌、季也蒙念珠菌)RNA扩增产物出现了特异性条带,而其他对照菌(烟曲霉、新型隐球菌、金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、纹带棒状杆菌、艰难梭菌)均无目标条带;NASBA结合电泳检测结果表明其对白色念珠菌的灵敏度可达1CFU/ml,特异性良好。NASBA、G试验及血培养诊断侵袭性念珠菌病的灵敏度分别是72.22%、55.56%、72.22%,特异性分别是90%、75%、100%。其中,病例组NASBA检测阳性的样本均来自念珠菌血症患者。结论:NASBA法的所有诊断性能都优于G试验;NASBA法的诊断灵敏度与血培养一致,其他诊断性能稍次于血培养,与血培养相比,NASBA法可缩短检测念珠菌检测时间,在诊断侵袭性念珠菌病,尤其念珠菌血症时具有高效、准确、简便等优势。建议对IC患者同时进行NASBA法和血培养检测。