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心包积液-肝炎综合征(Hydropericardium hepatitis syndrome,HHS)主要是由血清4型Ⅰ群禽腺病毒(Fowl adenovirus serotype 4,FAdV-4)引起的一种家禽传染性疾病。该病主要侵害35周龄肉鸡,其典型病变为心包积液和包涵体肝炎。自2015年6月以来,我国许多省份的肉鸡群先后爆发此病,并且从肉鸡群逐渐蔓延至蛋鸡、种鸡群和樱桃谷肉鸭群,严重危害我国养禽业的健康发展。近年来,国内有个别鹅只感染禽腺病毒的报道,但都没有进行深入的研究。本研究中,我们从自然感染的病鸭中分离到一株FAdV-4,并将其命名为SDJN株。通过动物试验确定了其对鹅的致病性,从而证实血清4型禽腺病毒可以同时感染鸭和鹅,为养禽生产上该病的防控提供了一定的流行病学资料。主要研究内容如下:1、本研究采用鸡胚卵黄囊接种法从山东济南以心包积液为主要特征的疑似FAdV-4感染的商品鸭肝脏组织中分离到病毒,并对分离毒株进行PCR鉴定、血凝试验、EID50测定、纯净度检测以及Hexon基因序列测定与分析等试验。PCR结果显示该毒株呈禽腺病毒阳性;该分离株不能够凝集鸡的红细胞;纯净度检测结果表明其他常见病毒PCR检测阴性;病毒的EID50为10-7.15/0.2 mL;将分离株的Hexon基因进行测序,确定该分离毒株为血清4型I群腺病毒,并与已发表的血清4型I群禽腺病毒Hexon基因进行核苷酸同源性比较和遗传进化分析,表明该毒株与另外两个中国大陆分离株在同一分支上,同源性为99.9%,而与韩国、欧洲、美洲株同源性为98.3%98.6%,相对较远。2、为探究FAdV-4分离株对鹅的致病性,本试验将225只1日龄泰州鹅(75只作为对照鹅,150只作为感染鹅)随机分成9个不同的组(6组作为实验组,另外3组作为阴性对照组)。在其10、20和30日龄时,分别通过口服途径和皮下注射途径人工感染6个实验组的鹅,每只鹅接种1mL含病毒的尿囊液,生理盐水接种鹅作为对照组。连续观察15 d,记录感染后的临床症状,并分别在3、6、9、12和15 dpi时,每组随机选择三只鹅进行剖杀,收集组织器官和血液样本。HE染色观察组织病理学变化、提取组织DNA检测各组织中病毒载量。同时以采集的血液分离血清检测生化指标(ALT,AST,LDH,ALP和UREA)和细胞因子(IL-2和IFN-α)。研究结果表明,10日龄皮下攻毒组的鹅临床症状较为明显,表现为精神抑郁和瘫痪,剖检病变表现为心包积液,肝脏、肺脏、肾脏、胸腺均呈现不同程度的出血或肿胀现象,病理组织学结果显示心肌间质水肿和轻度炎性细胞浸润;肝脏细胞核中出现嗜碱性包涵体;脾脏出淋巴细胞减少和局灶性坏死;肺部动脉壁增厚和肺毛细血管充血;肾脏大量液泡坏死,肾小球肿胀和发炎,肾小管脱落和炎性细胞浸润;法氏囊和胸腺均显示淋巴细胞减少和间质水肿。各日龄口服攻毒组和30日龄皮下攻毒组未表现出明显的临床症状和剖检变化。另外,实时定量PCR检测结果显示,收集的各组织器官均检测到了病毒的存在,其中以肝脏和肾脏中病毒含量较高,小日龄攻毒组鹅的病毒载量高于大日零攻毒组。细胞因子水平检测结果为各攻毒组鹅IL-2和IFN-α水平均先上升后下降,表明鹅对FAdV-4的入侵产生了较为强烈的免疫应答。血液生化指标检测显示,10日龄攻毒组的各项指标显著高于对照组,FAdV-4对鹅的心肝肾造成严重损伤,20日龄攻毒组各项指标稍低于10日龄攻毒组,而30日龄攻毒组各指标和对照组差异不显著。以上结果说明鹅对于FAdV-4的感染呈现一种与年龄相关的抵抗力。