斑节对虾(Penaeus monodon)是中国沿海重要的捕捞、养殖优质经济虾类,由于中国近海的斑节对虾野生资源已出现衰退,因此斑节对虾也是中国重要的增殖放流优良品种。在增殖放流与养殖过程中,斑节对虾幼虾常受到高密度、操作、捕捞、低温和高温等刺激。在经历以上胁迫后,斑节对虾幼虾的生理代谢平衡被打破,导致其出现组织受损、储能物质被大量消耗甚至猝死,严重影响其放流与养殖存活率,对增养殖的效益产生不利影响。因此有必要探究放流规格的斑节对虾幼虾在经历运输过程中的可能受到的刺激后的生理代谢变化情况,以优化放流苗种运输策略,保护放流幼虾健康,以提升增养殖的经济效益。本研究通过分析斑节对虾幼虾在力竭运动后的抗氧化和呼吸代谢能力和斑节对虾幼虾在运输过程中的抗氧化和呼吸代谢能力变化情况,以及不同的运输个体密度与运输水体温度对斑节对虾幼虾抗氧化能力的影响,探究其受到力竭运动和运输胁迫刺激时的生理响应机制和通过分析不同运输参数对运输幼虾机体造成的损伤程度,筛选出适宜的运输参数,以供实际生产工作参考。(1)斑节对虾幼虾力竭运动后的抗氧化能力与呼吸代谢能力的变化由于在斑节对虾(Penaeus monodon)增养殖过程中常出现被捕捞和攻击胁迫,遂以增殖放流规格的斑节对虾幼虾(2.0±0.4cm)为研究对象,分析其力竭运动后的抗氧化能力和呼吸代谢恢复规律。结果显示,在力竭后的各恢复时间点,斑节对虾幼虾肝胰腺总蛋白质量浓度(TP)、乳酸质量浓度(LA),以及谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)、乳酸脱氢酶(LDH)和琥珀酸脱氢酶(SDH)活性均存在显著差异(P<0.05);腹部肌肉中,LA、LDH活性存在显著差异(P<0.05)。肝胰腺TP在恢复4 h后显著高于对照组,第48小时恢复至对照组水平;LA在恢复12h后显著高于对照组,24 h恢复至对照组水平;AST和ALT活性在运动后第8—第12小时内显著上升,第24小时恢复至对照组水平;LDH和SDH活性持续上升,恢复12h后显著高于对照组,48h后恢复至对照组水平。肌肉糖原质量浓度(GLY)在运动后显著下降,恢复12h后恢复至对照组水平;LA在运动后显著升高,8h后下降至对照组水平;LDH活性运动后显著升高,第1—第12小时内持续升高,在第72小时仍显著高于对照组水平。幼虾体内的超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、过氧化物酶(POD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性,总抗氧化能力(T-AOC)和丙二醛(MDA)含量,均与对照组无显著差异;第1～12 h,SOD、CAT、POD活性、MDA含量和T-AOC持续下降,GSH-Px活性无显著变化;第24h,SOD、CAT、POD活性显著降低,GSH-Px活性、MDA含量、T-AOC显著升高;第72h,SOD、CAT活性仍显著低于对照组,GSH-Px、POD活性和MDA含量恢复至对照组,TAOC显著高于对照组。在力竭运动过程中幼虾的酶促抗氧化系统未被激活;幼虾的抗氧化能力在力竭运动后的24h内较低,不宜再次受刺激;24h后显著上升,并保持较长时间。幼虾在力竭运动后无氧代谢显著增强,8 h后可再次进行力竭运动;肝胰腺为幼虾清除代谢物的器官,对运动后呼吸代谢恢复起到重要作用。(2)斑节对虾幼虾运输过程中的抗氧化能力与呼吸代谢的变化为探究斑节对虾幼虾(2.0±0.4 cm)在运输过程中的生理代谢变化水平,本研究通过在实验室环境中进行5小时的斑节对虾幼虾的模拟塑料袋装运输实验,并测定运输过程中的运输水质、幼虾体内的抗氧化能力生理指标和呼吸代谢生理指标的变化情况。结果显示,在运输过程中,运输水体的DO、氨氮质量浓度和亚硝酸盐质量浓度均处于安全范围;随运输时长的变化,幼虾整体的SOD活性、GSH水平存在显著差异(P<0.05),肌肉和肝胰腺中的TP、GLY、LA、AST、ALT、LDH、SDH活性均存在极显著差异(P<0.05)。幼虾体内SOD活性GSH质量浓度和T-AOC在经历包装后即显著上升,之后一直显著高于对照组,MDA质量浓度在经历包装后显著上升,第1小时之后显著下降至低于对照组的水平。肝胰腺TP在运输1小时候显著降低;肌TP在运输过程中逐渐上升,第1.5小时后显著高于对照组水平;肝GLY在经历包装后即显著下降,之后没有恢复;肌GLY在第1—第1.5小时显著升高,高于对照组水平;肝胰腺LA和AST活性在第1.5小时时显著上升,之后逐渐下降;肝胰腺ALT活性在运输过程中逐渐下降,第5小时显著低于对照组;肝胰腺LDH活性在运输第4小时时极显著升高;肝胰腺SDH活性在第1.5小时极显著升高,之后下降至对照组水平;肌LA、AST活性、ALT活性、LDH活性和SDH活性在运输过程中逐渐下降至低于对照组的水平。从结果分析,包装操作胁迫刺激了斑节对虾幼虾的抗氧化系统;在运输过程中机体可通过消耗肝胰腺中的储能物质以维持代谢稳态,肌肉中的代谢活动减弱,并有储存了机体中游离能量物质。(3)运输密度差异对斑节对虾幼虾运输后的抗氧化能力恢复的影响为探究斑节对虾斑节对虾增殖放流的适宜运输密度,以及幼虾经历不同密度的运输胁迫后的机体生理响应恢复情况,本研究以斑节对虾幼虾(3.0±0.4cm)为实验对象,设计5个密度组(D1-200 ind、D2-250 ind/L、D3-300 ind/L、D4-400 ind/L和D5-500 ind/L)在实验室环境中模拟塑料袋装运输过程,运输过程持续5小时。运输结束后测定各组运输水体的的水质参数和幼虾肝胰腺与腹部肌肉中的抗氧化能力指标。结果显示,不同运输密度与运输后的不同恢复时间对幼虾肝胰腺与肌肉中的抗氧化生理指标均有显著交互作用(P<0.05)。各密度组运输水体的DO、氨氮质量浓度和亚硝酸盐质量浓度均处于安全范围,氨氮质量浓度和亚硝酸盐质量浓度随运输密度上升而上升。各组肝胰腺TP水平在运输后均有下降,下降幅度与运输密度成正比,在第24小时均恢复至对照组水平。D4和D5组的肝胰腺SOD活性在运输后显著升高,并保持在较高水平;D1和D2组SOD活性在之后的恢复过程中呈下降趋势。D4和D5肝胰腺GSH水平在运输后显著下降,所有密度组的GSH水平之后均呈上升趋势,第72小时达到显著高于对照组的水平。各组肝胰腺的T-AOC在运输后均显著下降,第72小时恢复至对照组水平。各组肝胰腺MDA水平在运输后显著下降,之后保持在较低水平。肌肉TP水平在运输后均有上升,上升幅度与运输密度成反比,在第48小时均下降至对照组水平;所有密度组的肌肉中的SOD活性、GSH水平和T-AOC在运输后均出现下降,下降幅度与密度成正比,在恢复过程中均显著低于对照组水平。各组的肌肉MDA水平在运输后均出现下降,下降幅度与密度成反比,在恢复中均无再次升高。实验结果表明,运输密度差异对幼虾的抗氧化应激有显著性影响,高运输密度可削弱幼虾的抗氧化能力,在运输温度为25℃、运输5小时的条件下,袋装运输斑节对虾幼虾的密度应在300—400ind/L。(4)运输温度差异对斑节对虾幼虾运输后的抗氧化能力恢复的影响本研究以斑节对虾幼虾(2.0±0.4cm)为实验对象,探究斑节对虾幼虾经历不同温度的运输胁迫后的机体生理响应恢复情况。设计5个温度组(T1-15℃、T2-20℃、T3-25℃、T4-30℃和T5-35℃)在实验室环境中模拟塑料袋装运输幼虾过程,运输过程持续5小时。运输结束后测定各组运输水体的的水质参数和幼虾肝胰腺与腹部肌肉中的抗氧化能力指标。结果显示,不同运输温度与运输后的不同恢复时间对幼虾肝胰腺与肌肉中的抗氧化生理指标均有极显著交互作用(P<0.01)。T4和T5组均出现较高幼虾死亡率,各温度组的氨氮质量浓度和亚硝酸盐质量浓度随运输温度上升而上升。T5组的肝胰腺TP在运输后显著下降,所有处理组的TP在恢复过程中呈现升后降,T4和T5组TP在第72小时显著低于对照组水平。T1、T2和T4组的肝胰腺SOD活性在运输后显著降低,第72小时仍未恢复至对照组水平。T2、T3和T4组的肝胰腺GSH水平在运输后出现下降,T5组的显著上升,各组在第48小时均恢复至高于对照组的水平。各组的T-AOC在运输后均显著下降,T5组T-AOC在第72小时恢复至对照组水平。T1、T4和T5组的肝胰腺MDA水平在运输后显著升高,在第24小时恢复至对照组水平。除T1外,各组的肌肉TP在运输后的均显著升高,并长期保持。除T1外,各组的肌肉SOD活性在运输后的均显著降低,T1组显著升高,在第72小时均恢复至对照组水平。除T1外,各组的肌肉GSH水平在运输后的均显著降低,T1组在恢复的第1—第8小时显著升高,第72小时各组GSH水平均低于对照组水平。各组的肌肉T-AOC在运输后的均显著降低,并一直低于对照组水平。T2、T3和T4组的MDA水平在运输后显著下降,T1和T4组MDA水平在分别在第8小时和第12小时显著升高,均在第72小时低于对照组水平。结果表明,高温和低温运输均会削弱斑节对虾幼虾的抗氧化能力,但低温运输更有利于保证运输幼虾体内的储能物质不被消耗,从而提高幼虾存活率。在运输密度为400ind/L、运输5小时的条件下,袋装运输斑节对虾幼虾的温度应在15—20℃。